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haichang

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】电泳条带看不见

用NEB BamHI-HF/NdeI酶切质粒(20ul体系,Buffer 4, 酶各0.5ul,37度,2h),跑电泳什么也看不见了;换用Fermentas BamHI/NdeI双酶切(37度,16h),PCR产物酶切后,条带还在,而pET-9a酶切后电泳什么也看不见了,用NdeI单酶切pET-9a电泳可看见正确条带,用BamHI/NdeI酶切载体(50ul体系,2×Buffer tango, 酶各1ul,37度,2h)就什么也看不见了,哪位高手帮帮忙解释下这是怎么回事呀,我该怎么办?
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时不我待
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j2

木虫 (正式写手)

你的载体上确定BamHI酶切位点只有一个
修炼ing,当虫仙……
6楼2010-08-22 16:41:06
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高陈冲

银虫 (初入文坛)

可能是酶的质量不好
愿你出走半生,归来仍是少年
2楼2010-08-21 21:11:00
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320080920001

金虫 (正式写手)

没怎么看懂 楼主可以分一个先后顺序吗?1234啥的
3楼2010-08-21 22:25:39
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zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上

haichang(金币+1): 2010-11-05 15:32:50
求上质粒电泳图
质粒质量不好双酶切也容易降解了
或者是酶污染了
又或者双酶切酶量过多导致甘油含量过高,星星活性了
终于熬成木虫了……
4楼2010-08-22 06:53:56
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