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western blot问题求助 已有5人参与
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今天做WB结果曝光后，胶片上什么都没有，曝光时间为5min和10min。（刚刚才开始学习做WB），整个过程很顺利，但就是爆不出结果。求助这是什么情况啊？ 大概过程如下： 制胶和蛋白定量共用时1h 跑胶过程中没有出现什么非正常情况 正常转膜 用脱脂奶粉封闭1h TBS.T清洗3次每次10min 敷一抗过夜4C‘冰箱（第二天取出来后又在37C摇床中摇了1h） TBS.T清洗3次每次10min 二抗1.5h TBS.T清洗3次每次10min 发光液A:B=1:1（总液与TBS比值为1:3） 曝光5min 10min 都没有背景 |
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