应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量Pcr问题求助
81/1返回列表
查看: 1997  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

好好后生

金虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量Pcr问题求助 已有1人参与

我做了荧光定量pcr ，采用delta delta CT 法，需要用两板，有内参β-actin ，还有目的基因clock，定量仪器的阈值是自动生成的  1在同一板上，仪器生成两条阈值，分别是所有不同样的内参基因的阈值和所有不同样clock基因的阈值，这两个阈值线为什么不在同一条水平线上，会影响结果吗 2 在另一个板上，也是内参基因β-actin和所有不同样clock基因，阈值也是不同的，如果我要比较这两板的目的基因的clock相对水平，阈值线需要重调吗，怎么调合适，因为我发现在两板上仪器自动生成的阈值线是有差异的，并且如果有一个空跑的不好，阈值线会发生比较大的变化
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-31 09:15:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
好好后生(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-31 15:30:03
好好后生: 金币+50, ★有帮助, 虽然没解决问题，还是感谢 2014-06-04 11:09:21
只要同一批PCR中同种基因的样品阈值相同就行
赞一下 回复此楼
2楼2014-05-31 12:18:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

好好后生

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-05-31 12:18:43
只要同一批PCR中同种基因的样品阈值相同就行

因为目的基因需要分两板做，那请问两批PCR阈值怎么设定，任然根据软件自动生成似乎不对，比方说有一个内参基因的孔出错了，平台期很低，导致全部的内参基因阈值都压低了，这好像需要手动调整，这样怎么调整才能保持两板之间的误差减少
赞一下 回复此楼
3楼2014-05-31 13:56:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 好好后生 at 2014-05-31 13:56:29
因为目的基因需要分两板做，那请问两批PCR阈值怎么设定，任然根据软件自动生成似乎不对，比方说有一个内参基因的孔出错了，平台期很低，导致全部的内参基因阈值都压低了，这好像需要手动调整，这样怎么调整才能保持 ...

手动设定
回复此楼
4楼2014-05-31 14:24:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

好好后生

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-05-31 14:24:55
手动设定...

请问两板之间的阈值怎么设定才能误差比较小，我知道同一批次的荧光定量目的基因和内参基因的阈值可以不一样，但是两板之间，我是否需要把目的基因和内参基因阈值调成同一水平，这两板的结果才能比较？
赞一下 回复此楼
5楼2014-05-31 15:27:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 好好后生 at 2014-05-31 15:27:52
请问两板之间的阈值怎么设定才能误差比较小，我知道同一批次的荧光定量目的基因和内参基因的阈值可以不一样，但是两板之间，我是否需要把目的基因和内参基因阈值调成同一水平，这两板的结果才能比较？...

直接输数字
回复此楼
6楼2014-05-31 17:06:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

好好后生

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-05-31 17:06:15
直接输数字...

您的意思是把两板的内参基因阈值都调成同一数值，目的基因阈值也调成同一数值，内参和目的基因的阈值可以不一样，对吗？
赞一下 回复此楼
7楼2014-05-31 21:44:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 好好后生 at 2014-05-31 21:44:03
您的意思是把两板的内参基因阈值都调成同一数值，目的基因阈值也调成同一数值，内参和目的基因的阈值可以不一样，对吗？...

嗯
8楼2014-06-03 08:43:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 好好后生 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 17/850 2026-03-22 15:18 by 脱颖而出
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 4/200 2026-03-22 11:04 by 搏击518
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 广西大学材料导师推荐 +3 夏夏夏小正 2026-03-17 5/250 2026-03-21 22:20 by 金昊ML
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 初始318分求调剂（有工作经验） +3 1911236844 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:33 by JourneyLucky
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +4 llllkkkhh 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300（化学）304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 材料，纺织，生物（0856、0710），化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭