24小时热门版块排行榜    

查看: 1966  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

好好后生

金虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量Pcr问题求助 已有1人参与

我做了荧光定量pcr ,采用delta delta CT 法,需要用两板,有内参β-actin ,还有目的基因clock,定量仪器的阈值是自动生成的  1在同一板上,仪器生成两条阈值,分别是所有不同样的内参基因的阈值和所有不同样clock基因的阈值,这两个阈值线为什么不在同一条水平线上,会影响结果吗 2 在另一个板上,也是内参基因β-actin和所有不同样clock基因,阈值也是不同的,如果我要比较这两板的目的基因的clock相对水平,阈值线需要重调吗,怎么调合适,因为我发现在两板上仪器自动生成的阈值线是有差异的,并且如果有一个空跑的不好,阈值线会发生比较大的变化
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 好好后生 at 2014-05-31 15:27:52
请问两板之间的阈值怎么设定才能误差比较小,我知道同一批次的荧光定量目的基因和内参基因的阈值可以不一样,但是两板之间,我是否需要把目的基因和内参基因阈值调成同一水平,这两板的结果才能比较?...

直接输数字
6楼2014-05-31 17:06:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
好好后生(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-31 15:30:03
好好后生: 金币+50, 有帮助, 虽然没解决问题,还是感谢 2014-06-04 11:09:21
只要同一批PCR中同种基因的样品阈值相同就行
2楼2014-05-31 12:18:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

好好后生

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-05-31 12:18:43
只要同一批PCR中同种基因的样品阈值相同就行

因为目的基因需要分两板做,那请问两批PCR阈值怎么设定,任然根据软件自动生成似乎不对,比方说有一个内参基因的孔出错了,平台期很低,导致全部的内参基因阈值都压低了,这好像需要手动调整,这样怎么调整才能保持两板之间的误差减少
3楼2014-05-31 13:56:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 好好后生 at 2014-05-31 13:56:29
因为目的基因需要分两板做,那请问两批PCR阈值怎么设定,任然根据软件自动生成似乎不对,比方说有一个内参基因的孔出错了,平台期很低,导致全部的内参基因阈值都压低了,这好像需要手动调整,这样怎么调整才能保持 ...

手动设定
4楼2014-05-31 14:24:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +5 pnpwoqbg8f 2026-02-16 5/250 2026-02-18 18:25 by 7pdbc5bdo2
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 18:12 by 7pdbc5bdo2
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 18:10 by 7pdbc5bdo2
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 17:57 by 7pdbc5bdo2
[基金申请] 情人节自我反思:在爱情中有过遗憾吗? +5 瞬息宇宙 2026-02-15 6/300 2026-02-18 12:51 by 月下雪林
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 11:09 by lqtl9djx19
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:54 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:39 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:53 by lqtl9djx19
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 07:55 by lotyj5cz79
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:40 by lotyj5cz79
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:23 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 00:40 by tk2gfblvuz
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 00:23 by tk2gfblvuz
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-17 23:40 by tk2gfblvuz
[基金申请] 基金正文30页指的是报告正文还是整个申请书 +3 successhe 2026-02-16 4/200 2026-02-17 20:56 by successhe
[基金申请] 今年春晚有几个节目很不错,点赞! +5 瞬息宇宙 2026-02-16 6/300 2026-02-17 12:49 by jymy19840415
[微米和纳米] 球磨粉体时遇到了大的问题,请指教! 10+3 6sbiam 2026-02-12 15/750 2026-02-16 15:03 by tgzxzqj
[基金申请] 过年走亲戚时感受到了所开私家车的鄙视链 +3 瞬息宇宙 2026-02-15 5/250 2026-02-16 14:23 by aspect3000
[硕博家园] 江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后 +3 cleverlyy 2026-02-12 3/150 2026-02-12 21:02 by qsdf1
信息提示
请填处理意见