24小时热门版块排行榜    

查看: 2347  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

好好后生

金虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量Pcr问题求助 已有1人参与

我做了荧光定量pcr ,采用delta delta CT 法,需要用两板,有内参β-actin ,还有目的基因clock,定量仪器的阈值是自动生成的  1在同一板上,仪器生成两条阈值,分别是所有不同样的内参基因的阈值和所有不同样clock基因的阈值,这两个阈值线为什么不在同一条水平线上,会影响结果吗 2 在另一个板上,也是内参基因β-actin和所有不同样clock基因,阈值也是不同的,如果我要比较这两板的目的基因的clock相对水平,阈值线需要重调吗,怎么调合适,因为我发现在两板上仪器自动生成的阈值线是有差异的,并且如果有一个空跑的不好,阈值线会发生比较大的变化
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 好好后生 at 2014-05-31 15:27:52
请问两板之间的阈值怎么设定才能误差比较小,我知道同一批次的荧光定量目的基因和内参基因的阈值可以不一样,但是两板之间,我是否需要把目的基因和内参基因阈值调成同一水平,这两板的结果才能比较?...

直接输数字
6楼2014-05-31 17:06:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
好好后生(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-31 15:30:03
好好后生: 金币+50, 有帮助, 虽然没解决问题,还是感谢 2014-06-04 11:09:21
只要同一批PCR中同种基因的样品阈值相同就行
2楼2014-05-31 12:18:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

好好后生

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-05-31 12:18:43
只要同一批PCR中同种基因的样品阈值相同就行

因为目的基因需要分两板做,那请问两批PCR阈值怎么设定,任然根据软件自动生成似乎不对,比方说有一个内参基因的孔出错了,平台期很低,导致全部的内参基因阈值都压低了,这好像需要手动调整,这样怎么调整才能保持两板之间的误差减少
3楼2014-05-31 13:56:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 好好后生 at 2014-05-31 13:56:29
因为目的基因需要分两板做,那请问两批PCR阈值怎么设定,任然根据软件自动生成似乎不对,比方说有一个内参基因的孔出错了,平台期很低,导致全部的内参基因阈值都压低了,这好像需要手动调整,这样怎么调整才能保持 ...

手动设定
4楼2014-05-31 14:24:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
请填处理意见