| 查看: 6703 | 回复: 39 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
园园补补铁虫 (小有名气)
|
[求助]
为什么提取RNA时出现一坨白色沉淀 已有13人参与
|
|||
| 提取RNA快一年时间了，之前提取效果一直很好，可是近两次却出现了出题：用Trizol提取RNA，加入异丙醇离心后就会出现一坨白色沉淀，用75%乙醇洗涤沉淀离心后依旧有很明显的白色沉淀，检测的A260/A280比值低于1.8，A260/A230比值低于2.0，（之前的实验没有出现过很明显的白色沉淀，而且A260/A280和A260/A230比值都很正常）。。。很困惑，实验没办法进行了。。。 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有177人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 细胞RNA提取一直失败 ，什么原因？
已经有8人回复
- 最近RNA提取出现问题，求助各位
已经有5人回复
- 原核生物 RNA提取
已经有17人回复
- 为什么我提取出的RNA，28s和18是条带一样亮
已经有8人回复
- 想不通找不到原因，到底怎么回事，心烦，rna提取问题
已经有15人回复
- DNA和RNA同时提取
已经有5人回复
- 异丙醇 沉淀 RNA 问题
已经有10人回复
- 提取RNA条带28/18为什么总是不成两倍关系啊？
已经有5人回复
- RNA提取，常温离心机离心1小时，还能提出来么？
已经有15人回复
- PCR提总RNA时，最后溶于DEPC水时有沉淀，不能完全溶解，是什么原因，能怎么补救
已经有8人回复
- 急，请大家帮帮忙，可以室温沉淀RNA吗？
已经有5人回复
- 质粒提取有白色沉淀，跑胶却没条带，啥原因？
已经有24人回复
- 请帮忙分析一下提取RNA遇到的问题
已经有19人回复
- 提取的大豆RNA条带太多 都什么带！！！
已经有14人回复
- 植物RNA的提取
已经有22人回复
- SDS-LiCl提取植物RNA
已经有15人回复
- 细菌全基因组提取时需要加入RNA酶吗？
已经有15人回复
- RNA提取后，看不到沉淀，能说明没有RNA吗？
已经有4人回复
- 细菌RNA提取后跑电泳出现一条暗带和在泳道中弥散都是什么原因？
已经有9人回复
- CTAB法提取RNA
已经有12人回复
- 基因组提取过程中加入溶菌酶有白色沉淀
已经有13人回复
- 柞蚕总RNA提取中，蛋白抽提不尽
已经有12人回复
- 提取RNA时，为何会有DNA条带，并且有且只有一条带？
已经有9人回复
- 【求助/交流】烟曲霉菌提取RNA
已经有11人回复
园园补补
铁虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1324.7
- 散金: 30
- 红花: 1
- 帖子: 237
- 在线: 56.3小时
- 虫号: 1662277
- 注册: 2012-03-03
- 性别: MM
- 专业: 生物信息学
9楼2014-05-28 14:24:14
飞约疯人院
专家顾问 (著名写手)
科学怪人
-
专家经验: +140 - MolEPI: 2
- 应助: 308 (大学生)
- 金币: 1107.5
- 散金: 8294
- 红花: 65
- 沙发: 5
- 帖子: 1996
- 在线: 266.1小时
- 虫号: 3188421
- 注册: 2014-05-07
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-05-27 19:04:44
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-05-27 19:04:44
|
楼主，请仔细看下我们的步骤： 按照TRizol一步法制备总RNA，其步骤简述如下：取膜荚黄芪的叶片500 mg，于液氮预冷的研钵中，液氮速冻后充分研磨成粉末，加入到加有5 mL TRizol的15 mL离心管中，混匀，室温放置5 min，使其充分裂解12 000 rpm，离心5 min，弃沉淀。加入1mL氯仿，震荡混和均匀后放于冰上15 min，于4 ℃，12000 rpm 离心15min。取上清液到新的离心管中，加入等量体积异丙醇，颠倒混合均匀，-20℃ 放置20 min以上，4 ℃，12 000 rpm离心10 min。去上清，加入5 mL 75 %冰乙醇，悬浮沉淀，4℃，12 000 rpm离心5 min，去上清，重复2次。在室温阴凉处空气干燥或真空干燥RNA沉淀。加入50 μL DEPC H2O溶解RNA，将抽提好的总RNA 保存于-70 ℃冰箱中。 |
2楼2014-05-27 14:43:40
Neo2000
木虫 (著名写手)
- 应助: 639 (博士)
- 金币: 8720.2
- 红花: 37
- 帖子: 1700
- 在线: 269.3小时
- 虫号: 322365
- 注册: 2007-03-11
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
3楼2014-05-27 15:13:23
园园补补
铁虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1324.7
- 散金: 30
- 红花: 1
- 帖子: 237
- 在线: 56.3小时
- 虫号: 1662277
- 注册: 2012-03-03
- 性别: MM
- 专业: 生物信息学
4楼2014-05-28 09:34:37
5