应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量PCR 模板问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1151  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

宁宁0320

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR 模板问题 已有2人参与

想做某种昆虫不同发育阶段体内某种菌的大概趋势，想做相对定量PCR，看有人用DNA做定量的，不是很明白，直接用DNA做定量和反转录做定量的区别？？分别适合什么情况？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
共生菌寻求实验盟友，互帮互助，实验进步
1楼 2014-05-21 09:29:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

宁宁0320

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 燕归来0101 at 2014-05-22 21:18:10
如果是看这种菌的含量变化，我觉得做绝对定量吧，构建标曲，然后在不同生长阶段取样品。我现在要做植物的含菌量变化，应该差不多，不过平行可能要多设置一些。

亲太感谢你回复我的帖子了，好几天都没人理我呀，我的这个虫子有5个若虫龄期，我想做5个若虫龄期和卵期，成虫阶段，菌量变化，我是刚刚接触定量，本想简单一点做个相对定量，但是好些东西还不太明白，
    1. 若是我做绝对定量，我这7个样本需要做几个标曲呢？虫子卵和一龄阶段虫龄很小，不好收集，提RNA很难呢，我看有人做其他虫的是仅仅做一个刚刚羽化的成虫的标曲。
    2.做标曲有做DNA 标曲的吗？
    3.相对定量其实模板浓度要一致吗？像我这种情况直接用DNA做相对定量，模板浓度很难控制.
赞一下 回复此楼
共生菌寻求实验盟友，互帮互助，实验进步
4楼2014-05-23 09:08:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

燕归来0101

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果是看这种菌的含量变化，我觉得做绝对定量吧，构建标曲，然后在不同生长阶段取样品。我现在要做植物的含菌量变化，应该差不多，不过平行可能要多设置一些。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-05-22 21:18:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

燕归来0101

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

还有，相对定量应该是看某种基因的表达量是上调还是下调了，所以需要先提取RNA，再反转录。你这个看菌量变化应该不用做RNA的。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2014-05-22 21:20:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangzwty

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1. 7格样本只需要做一个标曲，做标曲的目的是确定一下你模板的稀释倍数。
2. 一般都是用cDNA做标曲的。
3.相对定量的模板浓度时一致的。
祝你成功！
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2014-06-16 15:47:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 324求调剂 +7 hanamiko 2026-03-26 9/450 2026-03-27 06:54 by 无际的草原
[考研] 284求调剂 +11 junqihahaha 2026-03-26 12/600 2026-03-27 04:37 by wxiongid
[考研] 317求调剂 +7 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 7/350 2026-03-27 02:29 by fmesaito
[考研] 316求调剂 +4 江辞666 2026-03-26 4/200 2026-03-27 00:33 by wxiongid
[考研] 286求调剂 +3 lim0922 2026-03-26 3/150 2026-03-26 23:07 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 +8 Auroracx 2026-03-22 8/400 2026-03-26 19:55 by 不吃魚的貓
[考研] 总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂 +5 星沉uu 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:02 by macy2011
[考研] 22 350 本科985求调剂，求老登收留 +4 李轶男003 2026-03-20 4/200 2026-03-26 16:05 by 哇啦啦啦xtj
[考研] 材料与化工考研调剂 +10 孅華 2026-03-22 10/500 2026-03-26 15:40 by zzll406
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
[考研] 生物技术与工程 +3 1294608413 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:02 by 1294608413
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 305分求调剂（食品工程） +5 Sxy112 2026-03-21 7/350 2026-03-24 12:27 by 544594351
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪！？！
[考研] 291求调剂 +5 孅華 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:20 by haoshis
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭