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er66668888

铜虫 (初入文坛)

[求助] DGGE用一轮PCR产物好还是二轮PCR产物好 已有3人参与

我没有用巢式PCR，只用一对引物扩增，一轮PCR产物做DGGE条带好少还比较暗，用二轮PCR产物感觉条带会多一些亮一些，那我是用二轮PCR产物做DGGE呢还是一轮呢，有做过的么，文献上没见有提到用二轮PCR产物做的。。。
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1楼 2014-05-20 10:29:36
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猪尾巴草

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-05-20 13:31:00
我没这样做过二轮PCR，我的做法是：一轮PCR是一对上下游引物，二轮PCR是另一对上下游引物，就是二轮pcr要比一轮PCR的碱基数少些，二轮PCR引物是针对一轮PCR设计的
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2楼2014-05-20 12:44:01
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美亿美生物

捐助贵宾 (职业作家)

技术服务-实验代做

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
你用的是哪对引物？
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3楼2014-05-20 16:13:22
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yijieyu1987

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我曾经做过巢式PCR，第二轮PCR引物根据第一轮PCR产物设计，上下游都往内几个-几十个碱基，这样避免PCR错配的产生，但又不影响目标片段的DGGE分析
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4楼2014-05-20 17:12:58
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er66668888

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 美亿美生物 at 2014-05-20 16:13:22
你用的是哪对引物？

NS1/GCFUNG
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5楼2014-05-21 15:57:47
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er66668888

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yijieyu1987 at 2014-05-20 17:12:58
我曾经做过巢式PCR，第二轮PCR引物根据第一轮PCR产物设计，上下游都往内几个-几十个碱基，这样避免PCR错配的产生，但又不影响目标片段的DGGE分析

我不用巢式pcr 我就一对引物
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6楼2014-05-21 15:59:18
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美亿美生物

捐助贵宾 (职业作家)

技术服务-实验代做
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
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5楼: Originally posted by er66668888 at 2014-05-21 15:57:47
NS1/GCFUNG

做真菌的，直接加GC夹扩
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7楼2014-05-21 17:12:44
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