| 查看: 3699 | 回复: 10 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
表达载体的转化实验 已有5人参与
|
||
| T载体的转化，我使用的是DH5a 感受态。准备做表达，看了一些文献，好像表达载体都用的BL21,两种感受态有什么区别？表达过程不能用DH5a 吗 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有203人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR产物连T载体转化后，阳性率低
已经有9人回复
- 关于表达载体 转化大肠杆菌 进行扩繁的问题
已经有9人回复
- 植物表达载体及农杆菌菌株
已经有4人回复
- 有人做过双报告基因的过表达质粒载体么？
已经有5人回复
- 双顺反子 表达载体的构建——求助！
已经有8人回复
- 电击转化各种不长，求助啊~~~
已经有6人回复
- T载体的阴性对照菌落比实验组多
已经有3人回复
- 纠结的分子实验，双酶切连不上，求助
已经有14人回复
- 寻求植物瞬时表达载体！
已经有10人回复
- 双元载体转化实验～总是失败
已经有3人回复
- 转化感受态后提取质粒，测浓度总是很低
已经有17人回复
- 原核表达载体构建老不成功，求助！
已经有20人回复
- 原核表达载体的构建
已经有37人回复
- 有关质粒转化结果
已经有17人回复
- 目的片段与表达载体的连接
已经有23人回复
- 表达载体的构建
已经有17人回复
- 表达载体构建的相关问题
已经有15人回复
- 啤酒酵母质粒转化求助
已经有7人回复
- 克隆基因和载体连接后转化至大肠杆菌，为什么每次涂板都是空平板没有菌落？
已经有17人回复
- 【求助/交流】为什么我的PCR产物总是连接不上T载体
已经有26人回复
- 【求助/交流】酿酒酵母表达载体的构建问题
已经有6人回复
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
8楼2014-05-19 14:53:18
zhaozhibozhi
金虫 (正式写手)
- 应助: 112 (高中生)
- 金币: 1512.3
- 散金: 5
- 红花: 11
- 帖子: 480
- 在线: 444.9小时
- 虫号: 1763195
- 注册: 2012-04-18
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
2楼2014-05-16 10:39:11
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流！ 2014-05-16 13:18:34
gyesang: 回帖置顶 2014-05-16 13:18:36
呀薯条: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢啊 2014-05-18 17:54:52
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流！ 2014-05-16 13:18:34
gyesang: 回帖置顶 2014-05-16 13:18:36
呀薯条: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢啊 2014-05-18 17:54:52
|
首先你需明白几个不同的概念，1. T载体是克隆载体，你的基因通过TA克隆法插入载体，这一步的目的是扩增基因，得到大量你要的目的基因片段，以便进行下一步表达载体的构建；DH5α是克隆菌株，不能用来做表达；2. 欲在大肠杆菌中表达外源基因，需要首先构建原核表达载体，如可将构建至T载体的目的通过双酶切切下来然后连接到表达载体上，如PET系列的载体等，构建成原核表达载体后，可将此载体转化表达菌株，如BL21(DE3,)等，如果你的目的基因含有稀有密码子，也可以转化Rosetta系列的表达菌株。最后将构建成功的基因工程菌进行诱导表达。 祝好！ |
3楼2014-05-16 13:01:57
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
5楼2014-05-17 17:18:05
