| 查看: 1488 | 回复: 7 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
ruchang2013铁虫 (初入文坛)
|
[求助]
这是重组后的验证 已有1人参与
|
|
|
这是pTKIP-cat与一段2.3kb的核酸片段做的重组工作，图为PCR验证及酶切验证。 IP1/glk2、galP1/IP2这2对引物，若重组成功，应该有1.5kb左右的条带，显然这样大小的条带不存在，说明重组失败，那为什么会存在大条带？ “对”为pTKIP-cat,若重组成功，重组质粒是7kb  2014.0427 17菌PCR酶切.png |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有237人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 单酶切失败。质粒验证显示正确，但是PCR验证与酶切验证出现很多问题，麻烦大家解决下
已经有4人回复
- 帮我看下这个HPLC图，为什么这个峰没有拉下来啊，验证纯度的
已经有7人回复
- 重组质粒提取，结果提取片段跑胶 比实际还大，请各位大侠给指点一下
已经有13人回复
- 用的pCDNA-5重组质粒，通过测序检验质粒+目的基因是否构建成功
已经有5人回复
- PET-32A重组质粒构建
已经有20人回复
- 重组质粒酶切验证没有目的条带
已经有7人回复
- 在win7安装materials studio6.1时进行liscence验证，出现了这个警告，请问怎么办？
已经有6人回复
- 大肠杆菌转化的奇怪问题
已经有8人回复
- 重组质粒单双酶切结果一样，奇怪了的……
已经有15人回复
- 我有几个克隆和基因重组的基本问题不太清楚，请各位帮帮忙！
已经有6人回复
- 欲检测重组蛋白能否被磷酸化
已经有5人回复
- 大肠杆菌中RecA+是什么？主要是+号怎么理解？
已经有4人回复
- ddddd
已经有52人回复
- 大肠杆菌基因重组时PKD46高温怎么都消除不了
已经有25人回复
- 请教重组质粒快检的具体方法以及原理。。。。
已经有15人回复
- 求PCR解！谢谢！
已经有13人回复
- 在基因重组过程中，怎样鉴别质粒载体是否被限制性内切酶切好？
已经有10人回复
906394648
新虫 (初入文坛)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 1372.2
- 散金: 21
- 帖子: 34
- 在线: 11.6小时
- 虫号: 2823654
- 注册: 2013-11-24
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2014-05-13 19:52:51
luwei13566
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 184 (高中生)
- 金币: 4352.9
- 散金: 97
- 红花: 35
- 帖子: 641
- 在线: 261.1小时
- 虫号: 2380655
- 注册: 2013-03-27
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ruchang2013(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-05-12 17:58:15
ruchang2013: 金币+3, 谢谢，是不是酶切时间也过短啊！我这次将质粒重新酶切观察到2条带，一条在3kb~5kb,另一条带在2kb~3kb，质粒本身是4kb。我一般酶切3~4h。或者体系不对？我是20μL加0.5μL的酶。 2014-05-13 16:48:57
感谢参与，应助指数 +1
ruchang2013(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-05-12 17:58:15
ruchang2013: 金币+3, 谢谢，是不是酶切时间也过短啊！我这次将质粒重新酶切观察到2条带，一条在3kb~5kb,另一条带在2kb~3kb，质粒本身是4kb。我一般酶切3~4h。或者体系不对？我是20μL加0.5μL的酶。 2014-05-13 16:48:57
|
引物与重组质粒其他位置发生的非特异结合，有大条带很正常~ 你的marker最大量程是5K而你的重组质粒是7K？marker不太合适，换一个更大一些的吧。不过从图上看连的不是你的基因，酶切偏小，PCR也没有，重组失败。~ |
2楼2014-05-12 15:13:20
luwei13566
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 184 (高中生)
- 金币: 4352.9
- 散金: 97
- 红花: 35
- 帖子: 641
- 在线: 261.1小时
- 虫号: 2380655
- 注册: 2013-03-27
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2014-05-13 17:43:45
luwei13566
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 184 (高中生)
- 金币: 4352.9
- 散金: 97
- 红花: 35
- 帖子: 641
- 在线: 261.1小时
- 虫号: 2380655
- 注册: 2013-03-27
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-06-01 16:58:29
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-06-01 16:58:29
| 我一般都是20ul加1ul酶 37度4个小时。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
ruchang20135楼2014-05-13 20:52:37
投票:
30