24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 4064  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xiangquanju

金虫 (小有名气)

[求助] 绝对定量PCR中标准品的疑问? 已有4人参与

要做一个功能基因的绝对定量,样品有废水,土壤,大概40多个
现在要做标准曲线,打算用含有目的基因的质粒做模板,有个疑问请教一下大家,我是不是可以只从某一样品中扩增这个功能基因,转化质粒用来做标准品!因为考虑到不同物种之间基因序列也有微小的差别,这种差别是不是可以忽略
选择这个某一样品用来扩增这个功能基因的时候,有没有需要注意的地方!
做荧光定量PCR的新手,望大家多指教
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pingwei_622

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我现在也遇到类似的问题,求助~!
6楼2015-01-14 19:11:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

Jacob_24

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiangquanju(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励热心回帖交流 2014-04-04 11:58:12
1.内参基因一般不会只选择一个 多选择几个吧,如果做真核的一般我们选B-actin,GAPDH,GUS...等
原核的话,你自己看看文献,选择几个内参
2.提醒一下,你构建的质粒,最后要切成线性
3.你检测的是很多样品中的某一个特定微生物物种的特定的某个/些基因,理论上可以从某个样品中扩,但最好如果有纯种微生物样品的DNA岂不是更好,减少干扰。
CCC
2楼2014-04-04 11:31:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jacob_24

木虫 (正式写手)

CCC
3楼2014-04-04 11:32:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangquanju

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Jacob_24 at 2014-04-04 11:31:48
1.内参基因一般不会只选择一个 多选择几个吧,如果做真核的一般我们选B-actin,GAPDH,GUS...等
原核的话,你自己看看文献,选择几个内参
2.提醒一下,你构建的质粒,最后要切成线性
3.你检测的是很多样品中的某 ...

谢谢你的回复
你说的选择内参是做相对定量的时候需要使用的吧
我是要通过对某一功能基因进行定量PCR,来分析相应的微生物群落差异
看了一些文献,都是用这个基因构建了一个质粒来制作绝对定量中的标准曲线
4楼2014-04-08 09:45:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085801电气专硕272求调剂 +18 电气李 2026-04-13 20/1000 2026-04-15 12:54 by cq2548
[考研] 367求调剂 +11 hffQAQ 2026-04-09 11/550 2026-04-14 17:48 by lhj2009
[考研] 材料专业344求调剂 +17 hualkop 2026-04-10 22/1100 2026-04-14 16:21 by sxdj2
[教师之家] 转长聘了 +7 简单化xn 2026-04-13 7/350 2026-04-14 14:50 by xindong
[考研] 245求调剂 +6 冰糖橘?汽水 2026-04-13 10/500 2026-04-14 10:49 by jyl0317
[考研] 机械工程313分找工科调剂 +4 双一流本科机械 2026-04-08 4/200 2026-04-14 07:32 by Abskk
[考研] 280求调剂 +13 wzzz王 2026-04-09 13/650 2026-04-12 00:31 by 勇攀高峰0126
[考研] 267求调剂 +8 再忙也要吃饭啊 2026-04-09 8/400 2026-04-11 21:42 by cfdbai
[考研] 283求调剂 +22 那个噜子 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 10:41 by 逆水乘风
[考研] 087100初试311求调剂 +4 任雅琴 2026-04-09 4/200 2026-04-11 10:33 by zhq0425
[考研] 311求调剂 +13 xyp想读书 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:41 by 猪会飞
[考研] 中药学调剂 初试324 +4 洋甘菊、 2026-04-10 6/300 2026-04-11 09:41 by gong120082
[考研] 一志愿京区985,085401,与本科专业一致,电子信息工程, +4 阳光开朗的男孩 2026-04-10 4/200 2026-04-10 18:27 by shenrf
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +9 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-09 10/500 2026-04-09 20:01 by Orcid
[考研] 083200 初试305分 求调剂 暂不考虑跨专业 +15 Claireyyyy 2026-04-09 15/750 2026-04-09 16:11 by zhuimr
[考研] 283电子信息求调剂 +4 三石WL 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:21 by wp06
[考研] 286求调剂 +19 Faune 2026-04-08 20/1000 2026-04-09 08:36 by 哦哦123
[考研] 085404,334分,求调剂 +5 sunjie8888 2026-04-08 8/400 2026-04-09 07:26 by sunjie8888
[考研] 求调剂,现在还能填的 +3 上岸小莹加油 2026-04-08 3/150 2026-04-08 14:30 by zhq0425
信息提示
请填处理意见