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新虫 (初入文坛)

[交流] 跑DNA的PAGE胶,变性胶和非变性胶的loadingbuffer的区别?去离子甲酰胺的作用是啥? 已有2人参与

跑DNA的PAGE胶,变性胶和非变性胶的loadingbuffer的区别?去离子甲酰胺、二甲苯青和溴酚蓝的作用分别是啥?
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erw82849478

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也是刚考上研究生,最近在做SSR,也出现了问题,但是您这个我在准备的时候看到过,二甲苯青和溴酚蓝都是指示剂,但是师兄说他们跑的速度不一样,我只用了溴酚蓝没加二甲苯青,去离子甲酰胺应该是起抱沉的作用,也有一定的变性作用(变性这个没太发现,网上看到的)
2楼2015-01-28 20:55:10
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Insecta_A

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by erw82849478 at 2015-01-28 20:55:10
我也是刚考上研究生,最近在做SSR,也出现了问题,但是您这个我在准备的时候看到过,二甲苯青和溴酚蓝都是指示剂,但是师兄说他们跑的速度不一样,我只用了溴酚蓝没加二甲苯青,去离子甲酰胺应该是起抱沉的作用,也 ...

你好,我最近也在做SSR引物筛选,我想请问你关于变性PAGE的几个问题?
1.我做的胶是连续型的6% PAGE,请问你的是不连续还是连续的?
2.我的胶的加样孔在取出梳子后出现扭曲收缩、加样孔内有残渣的情况(室温放置2个小时后),请问这个问题大概是什么原因造成的?
3.你做胶一般放置多长时间?
4.加样前是否要用移液枪吹洗加样孔?
5.加样是用微量进样器加么?样品DNA是否需要进行95℃变性处理?
3楼2015-04-08 10:19:41
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