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f847852005

金虫 (初入文坛)

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[求助] 有关TAKARA T4连接酶已有3人参与

有人用过TAKARA的T4连接酶么？他的反应体系、反应时间、反应温度和一般的T4一样么？为什么说明书上什么都没有

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好好读文献好好做实验

1楼 2014-03-19 20:31:33

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木木一家人

新虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
f847852005(gyesang代发): 金币+3, 鼓励回帖交流经验！ 2014-03-31 19:23:00

我最近用了这个酶。25ul和50ul体系都做了。但是效果没有50ul的好，具体如下：buffer 5 ul；T4连接酶2ul；我连接的序列连接比例设置为1:2,分别是5pmol和10pmol（根据自己的需要再调整吧）。。之前也做了16度过夜，但是发现没有37度半小时效果好。。推荐使用37度水浴半小时。。希望能帮到你。