应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » TAKARA的 T4 DNA 连接酶在室温下多久会失活?如果在16℃下反应多久会失活?
101/1返回列表
查看: 12759  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

14125kid

新虫 (初入文坛)

[求助] TAKARA的 T4 DNA 连接酶在室温下多久会失活?如果在16℃下反应多久会失活?

我知道T4 DNA ligase的最佳反应温度是16℃,可以连过夜,那么酶的作用时间大约为多长呢?是只有几个小时还是可以十几个小时一直有作用?
     在加样过程中如果耽误了时间,加了酶的体系在室温下放了十分钟会不会影响酶活?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-03-17 16:36:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-03-18 08:30:42
没用过takara的，一直用的是NEB，不过在室温放十分钟不会影响你的实验结果
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2013-03-17 17:03:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wchuangqi

铜虫 (小有名气)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 应助指数-1, 谢谢参与，不过回帖更倾向于交流，而不是应助 2013-03-20 07:52:25
做任何实验之前都要认真阅读产品说明书，严格按照说明书上去做。
赞一下 回复此楼
天道酬勤
3楼2013-03-18 08:52:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-03-20 07:52:39
我们用的TaKaRa的solution 1，一般小片段（<1000bp）6h，长一些的就过夜，16℃。
赞一下(3人) 回复此楼
4楼2013-03-19 09:01:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dy_414

木虫 (正式写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 应助指数-1, 谢谢参与，不过回答很难理解 2013-03-20 07:53:27
室温啊，找个冰盒吧
赞一下 回复此楼
我坚信，rp是攒出来的
5楼2013-03-19 22:25:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dearzhanglei

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
14125kid: 金币+1, ★有帮助 2013-03-20 22:55:51
wizardfan: 金币+2, 鼓励新虫发帖 2013-03-21 08:15:09
我们用的也是TaKaRa的solution 1，冰盒上操作，每次都是4℃过夜。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2013-03-20 08:48:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kagamiya

新虫 (初入文坛)
我们用Transgen的，ligase都大同小异。
说明书上说20-25度反应10分钟，我从来都是室温过夜，做克隆一直很顺利。
赞一下 回复此楼
7楼2013-03-22 23:37:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

375697868

新虫 (初入文坛)
没有关系，室温放十多分钟是不会影响结果的。
赞一下 回复此楼
8楼2013-07-27 12:04:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Dison8380

铁虫 (小有名气)
看说明书怎么说的吧
如果实际情况的话，目前室温也在16°左右吧
赞一下 回复此楼
9楼2013-10-28 17:32:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lcu0919

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by kagamiya at 2013-03-22 23:37:14
我们用Transgen的，ligase都大同小异。
说明书上说20-25度反应10分钟，我从来都是室温过夜，做克隆一直很顺利。

连接反应，对酶切后的纯度有关吗？
赞一下 回复此楼
敢想，敢拼！
10楼2013-11-27 13:36:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 14125kid 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 281求调剂（0805） +6 烟汐忆海 2026-03-16 16/800 2026-03-19 00:59 by 烟汐忆海
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +5 陌の森林 2026-03-18 5/250 2026-03-18 22:18 by bingxueer79
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以） +3 xbxudjdn 2026-03-18 3/150 2026-03-18 22:14 by zhq0425
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +3 生物工程调剂 2026-03-17 7/350 2026-03-18 20:41 by Wangjingyue
[考研] 0703化学调剂 +7 妮妮ninicgb 2026-03-15 11/550 2026-03-18 19:48 by macy2011
[考研] 295求调剂 +3 一志愿京区211 2026-03-18 5/250 2026-03-18 17:03 by zhaoqian0518
[教师之家] 焦虑 +8 水冰月月野兔 2026-03-13 12/600 2026-03-18 15:27 by 咪呜喵呜
[考研] 266求调剂 +5 阳阳哇塞 2026-03-14 9/450 2026-03-18 15:05 by stone_128
[考研] 314求调剂 +8 无懈可击的巨人 2026-03-12 8/400 2026-03-18 14:50 by haxia
[考研] 311求调剂 +11 冬十三 2026-03-15 12/600 2026-03-18 14:36 by 星空星月
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 考研化学学硕调剂，一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 学硕285求调剂 +13 Wisjxn 2026-03-12 46/2300 2026-03-14 10:33 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭