应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » TAKARA的 T4 DNA 连接酶在室温下多久会失活?如果在16℃下反应多久会失活?
101/1返回列表
查看: 12883  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

14125kid

新虫 (初入文坛)

[求助] TAKARA的 T4 DNA 连接酶在室温下多久会失活?如果在16℃下反应多久会失活?

我知道T4 DNA ligase的最佳反应温度是16℃,可以连过夜,那么酶的作用时间大约为多长呢?是只有几个小时还是可以十几个小时一直有作用?
     在加样过程中如果耽误了时间,加了酶的体系在室温下放了十分钟会不会影响酶活?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-03-17 16:36:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-03-18 08:30:42
没用过takara的，一直用的是NEB，不过在室温放十分钟不会影响你的实验结果
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2013-03-17 17:03:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wchuangqi

铜虫 (小有名气)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 应助指数-1, 谢谢参与，不过回帖更倾向于交流，而不是应助 2013-03-20 07:52:25
做任何实验之前都要认真阅读产品说明书，严格按照说明书上去做。
赞一下 回复此楼
天道酬勤
3楼2013-03-18 08:52:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-03-20 07:52:39
我们用的TaKaRa的solution 1，一般小片段（<1000bp）6h，长一些的就过夜，16℃。
赞一下(3人) 回复此楼
4楼2013-03-19 09:01:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dy_414

木虫 (正式写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 应助指数-1, 谢谢参与，不过回答很难理解 2013-03-20 07:53:27
室温啊，找个冰盒吧
赞一下 回复此楼
我坚信，rp是攒出来的
5楼2013-03-19 22:25:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dearzhanglei

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
14125kid: 金币+1, ★有帮助 2013-03-20 22:55:51
wizardfan: 金币+2, 鼓励新虫发帖 2013-03-21 08:15:09
我们用的也是TaKaRa的solution 1，冰盒上操作，每次都是4℃过夜。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2013-03-20 08:48:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kagamiya

新虫 (初入文坛)
我们用Transgen的，ligase都大同小异。
说明书上说20-25度反应10分钟，我从来都是室温过夜，做克隆一直很顺利。
赞一下 回复此楼
7楼2013-03-22 23:37:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

375697868

新虫 (初入文坛)
没有关系，室温放十多分钟是不会影响结果的。
赞一下 回复此楼
8楼2013-07-27 12:04:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Dison8380

铁虫 (小有名气)
看说明书怎么说的吧
如果实际情况的话，目前室温也在16°左右吧
赞一下 回复此楼
9楼2013-10-28 17:32:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lcu0919

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by kagamiya at 2013-03-22 23:37:14
我们用Transgen的，ligase都大同小异。
说明书上说20-25度反应10分钟，我从来都是室温过夜，做克隆一直很顺利。

连接反应，对酶切后的纯度有关吗？
赞一下 回复此楼
敢想，敢拼！
10楼2013-11-27 13:36:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 14125kid 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +15 Faune 2026-04-08 16/800 2026-04-09 03:39 by 孙小小12457
[考研] 266求调剂 +5 08电气工程 2026-04-03 5/250 2026-04-08 20:22 by 逆水乘风
[考研] 求调剂 一志愿西南交通大学085701环境工程 282分 +15 多多爱吃汉堡 2026-04-04 16/800 2026-04-08 11:39 by i_cooler
[考研] 336求调剂，一志愿中科大 +9 墨彧 yuyu 2026-04-06 9/450 2026-04-08 11:24 by 想读书的菌菌
[考研] 电子信息270求调剂 +7 terminal469 2026-04-07 7/350 2026-04-08 08:48 by tt19890111
[考研] 288求调剂 +12 没有答案_ 2026-04-05 12/600 2026-04-08 00:17 by T可可西里T
[考研] 363求调剂 +9 zh096 2026-04-04 9/450 2026-04-07 21:51 by 418490947
[考研] 315求调剂 +3 TUZEIQAQ 2026-04-02 3/150 2026-04-07 17:32 by chenp123
[考研] 22408 调剂材料 +7 我叫ez 2026-04-06 8/400 2026-04-07 17:12 by 蓝云思雨
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-07 11/550 2026-04-07 15:13 by shdgaomin
[考研] 工科370求调剂 +3 溏心煎鸡蛋 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:55 by 这是一个无聊的�
[考研] 262求调剂 +7 天下第一文 2026-04-04 8/400 2026-04-05 21:31 by 激流勇渡
[考研] 材料专硕322分 +10 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-04 10/500 2026-04-05 21:22 by 学员8dgXkO
[考研] 调剂 +3 李广火 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:57 by 蓝云思雨
[考研] 284求调剂 +7 徐同学_001 2026-04-04 13/650 2026-04-05 17:19 by yulian1987
[考研] 材料与化工306分找调剂 +12 沧海轻舟e 2026-04-03 13/650 2026-04-04 23:45 by lqwchd
[考研] 292求调剂 +11 2022080213 2026-04-04 13/650 2026-04-04 18:38 by macy2011
[考研] 334求调剂 +8 曾仰之 2026-04-03 8/400 2026-04-04 11:16 by w_xuqing
[考研] 求调剂 +4 15064154688 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:07 by zrongyan
[考研] 330求调剂 +3 白神呜呼呼 2026-04-02 3/150 2026-04-03 10:15 by 蓝云思雨
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭