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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 构建载体很久了就是不长斑，急急急！！！
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zsewqa129

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1楼 2013-04-19 09:13:22
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带刺毛毛虫

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
zsewqa129: 金币+20, ★★★★★最佳答案, 谢谢了，很有帮助 2013-04-25 17:10:24
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-04-28 13:51:39
引用回帖:
6楼: Originally posted by zsewqa129 at 2013-04-22 21:23:56
连接体系10微升   载体  1  微升
                              DNA    4  微升
                 KATARA solution1   5微升
16度过夜连接

katara大肠杆菌H5@感受态，5微升连接液，50微升感受态，30min冰浴 ...

是摩尔比，不是体积比也不是质量比。
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加油
7楼2013-04-23 15:13:19
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带刺毛毛虫

银虫 (小有名气)
★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-04-28 13:52:22
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9楼: Originally posted by zsewqa129 at 2013-04-23 20:03:05
摩尔比怎么算呀，呵呵，这个不懂...

举个例子
同样100毫克的DNA
载体5000bp   目的片段500bp
摩尔比     载体：目的片段=1:10
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13楼2013-04-24 15:27:24
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普通回帖

sl35537417

木虫 (正式写手)
一步步地确定 就会找到问题
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2楼2013-04-19 09:29:25
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带刺毛毛虫

银虫 (小有名气)

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★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流，期待你的精彩1 2013-04-23 21:00:56
酶切你切的是什么？注意以下链接比例，小片段：大片段=3-10:1，体系不要大
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3楼2013-04-19 09:30:43
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wangqi1107

银虫 (小有名气)

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感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流，期待你的精彩1 2013-04-23 21:01:06
每一步的图片发过来看看 ，你回收的怎么样？酶切的怎么样？连接体系是什么？转化过程是什么？每一步都说清楚，这样才可能分析原因。
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4楼2013-04-19 11:34:06
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zsewqa129

禁虫 (初入文坛)
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5楼2013-04-22 20:53:18
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zsewqa129

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6楼2013-04-22 21:23:56
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带刺毛毛虫

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zsewqa129 at 2013-04-22 20:53:18
质粒和回收的PCR产物双酶切，比例是4:1
目的片段是500bp，质粒约6.9kb...

是摩尔比，不是体积比，更不是质量比
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8楼2013-04-23 15:14:32
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zsewqa129

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9楼2013-04-23 20:03:05
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XOooZzz

银虫 (小有名气)
用的是什么酶？
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10楼2013-04-23 21:44:12
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