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飘零星lin

金虫 (小有名气)

[求助] 各位大神帮帮忙设计一对引物。已有7人参与

本人初次接触分子生物学和pcr,现在需要用pcr扩增一段小片段的基因.待扩增片段在附件中。本人菜鸟,求大神帮忙设计一对pcr引物。谢谢
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  • 附件 1 : 待扩增片段.doc
  • 2014-03-18 21:27:41, 23.5 K

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永峰1230

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Fleaves at 2014-03-19 18:19:30
primer5...

请问,这个引物是不是只能扩增他的300个序列中的100---280左右呢,,这个不太明白,谢谢你
12
8楼2014-03-19 21:01:39
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achonghello

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
飘零星lin(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 19:23:37
第一:把你的序列放在primer premier 5里面进行设计
刷选,然后保存序列
第二:在NCBI BLAST里面验证你设计的引物

前面貌似有人发过帖子primer premier 怎么用,可以看一看
14楼2014-03-20 10:56:56
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普通回帖

Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-19 15:59:44
正向5'  AGATGGCTATCATTACTT  3'
反向5'  GAGGCGTTTTATTATTCC  3'
2楼2014-03-19 10:10:16
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Fleaves at 2014-03-19 10:10:16
正向5'  AGATGGCTATCATTACTT  3'
反向5'  GAGGCGTTTTATTATTCC  3'

上楼,是怎么设计 的呢,
12
3楼2014-03-19 12:36:06
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飘零星lin

金虫 (小有名气)

请问有用软件评价过吗?
4楼2014-03-19 13:19:44
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飘零星lin

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Fleaves at 2014-03-19 10:10:16
正向5'  AGATGGCTATCATTACTT  3'
反向5'  GAGGCGTTTTATTATTCC  3'

好像不对吧。没有互补配对哦。
5楼2014-03-19 13:24:16
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 飘零星lin at 2014-03-19 13:24:16
好像不对吧。没有互补配对哦。...

爱信不信
6楼2014-03-19 18:18:53
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-03-19 12:36:06
上楼,是怎么设计 的呢,...

primer5
7楼2014-03-19 18:19:30
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-03-19 21:01:39
请问,这个引物是不是只能扩增他的300个序列中的100---280左右呢,,这个不太明白,谢谢你...

对的,扩增出来大概100多

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2014-03-20 00:35:41
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fnlhl

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我怎么都不明白这对引物是怎么出来的,我用http://bioinfo.ut.ee/cgi-bin/primer3-0.4.0/primer3_results.cgi这个网址进去怎么得到的:GCTGGAAAAAGAGAGATGGCTA
ATCGCATGAGGCGTTTTATT?怎么来的啊,请讲讲啊,非常感谢
10楼2014-03-20 06:26:38
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