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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 各位大神帮帮忙设计一对引物。
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匿名

用户注销 (著名写手)
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11楼2014-03-20 07:21:14
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是需要扩增这全部序列还是要其中一部分，你设计好引物用这个网址检测一下引物好用否。http://www.basic.northwestern.edu/biotools/oligocalc.html
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hehe
12楼2014-03-20 08:21:28
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
???????:
9?: Originally posted by Fleaves at 2014-03-20 00:35:41
???????????????100??
...

请问，如果他的全部扩增，需??知???这个基因?????几个碱基对???，谢谢

[ ????С??????? ]
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12
13楼2014-03-20 09:41:34
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achonghello

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
飘零星lin(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 19:23:37
第一：把你的序列放在primer premier 5里面进行设计
刷选，然后保存序列
第二：在NCBI BLAST里面验证你设计的引物

前面貌似有人发过帖子primer premier 怎么用，可以看一看
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14楼2014-03-20 10:56:56
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achonghello

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
飘零星lin(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 19:24:09
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7095779&fpage=1
可以看一下，自己学会如何设计才是最好的
授人以鱼不如授人以渔
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15楼2014-03-20 11:01:34
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
???????:
13?: Originally posted by ????1230 at 2014-03-20 09:41:34
请问，如果他的全部扩增，需??知???这个基因?????几个碱基对???，谢谢
...

?????????????????????????????????????????????????
лл
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12
16楼2014-03-20 11:48:59
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旧西圆

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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正向：GATGGCTATCATTACTTT
反向：AGGCGTTTTATTATTC
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17楼2014-03-20 12:48:30
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
9楼: Originally posted by Fleaves at 2014-03-20 00:35:41
对的，扩增出来大概100多
...

鍏ㄩ儴鎵╁鎬庝箞寮勫憿

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12
18楼2014-03-20 18:17:27
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飘零星lin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-03-20 08:21:28
你是需要扩增这全部序列还是要其中一部分，你设计好引物用这个网址检测一下引物好用否。http://www.basic.northwestern.edu/biotools/oligocalc.html

我需要扩增全序列，谢谢
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19楼2014-03-20 18:53:43
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飘零星lin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by louis_cheung at 2014-03-20 07:21:14
经典做法，待扩增序列正义链、反义链5'端各取20~25个碱基，确保GC含量在40-60%，再加上标签、酶切位点等即可.

可是我要扩增全部片段，是不是只能改变引物的长度了？
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20楼2014-03-20 18:58:59
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