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小鼠组织基因组DNA提取 已有3人参与
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菜鸟一枚,用小鼠肝脏、肌肉和脂肪提取DNA，电泳结果不是弥散就是条带很暗--特别暗，特别少，后续还要留作表观修饰用，这根本量不够啊！！！！！求大神指点啊，急用啊，愁死了啊，这实验做的根本睡不着了都。。。用酚氯仿手提过，也用索来宝kit提取过，结果都没能提出单一条带过，亮也没亮过，我有这么祟啊，不是应该比RNA容易提取啊，可是我这RNA提的很好啊，28、18清晰可见，，，我难道受诅咒了么！！！大神啊，大神啊，你快快粗线吧，小女子在这里感激涕零啦，，，谁能帮忙从小鼠组织中提取出高质量的DNA啊！！！组织量不是太多，20mg~100mg！！！！求指点  现在只有这么多金币，先赊着好不 |
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若溪
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【答案】应助回帖
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bealady: 金币+10, ★有帮助 2014-05-29 14:45:51
bealady: 金币+10, ★有帮助 2014-05-29 14:45:51
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转载： 一种快速提取小鼠组织ＤＮＡ的方法，其特征在于包括以下步骤： （１）剪取小鼠尾巴末端或小鼠足趾置入试管内； （２）向试管管内加入５０微升～２００微升、２０ｍＭ－２００ｍＭ的氢氧化钠溶液，并将试管置入ＰＣＲ仪器内，加热至９０℃～１０ ０℃并持续加热０．５～１．５小时； （３）取出试管，加入１０微升、酸性的１Ｍ三羟甲基氨基甲烷溶液； （４）剧烈震荡试管，至小鼠尾巴末端或小鼠足趾组织完全溶解； （５）再将试管置入ＰＣＲ仪器内，离心分离５分钟，转速范围为５０ ００ｒｐｍ～１５０００ｒｐｍ； （６）收集上清液，取１微升的上清液加入基因型的鉴定ＰＣＲ反应体系。 |
5楼2014-05-28 10:44:18
