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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 小鼠组织基因组DNA提取
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bealady

铜虫 (正式写手)

[求助] 小鼠组织基因组DNA提取 已有3人参与

菜鸟一枚,用小鼠肝脏、肌肉和脂肪提取DNA，电泳结果不是弥散就是条带很暗--特别暗，特别少，后续还要留作表观修饰用，这根本量不够啊！！！！！求大神指点啊，急用啊，愁死了啊，这实验做的根本睡不着了都。。。用酚氯仿手提过，也用索来宝kit提取过，结果都没能提出单一条带过，亮也没亮过，我有这么祟啊，不是应该比RNA容易提取啊，可是我这RNA提的很好啊，28、18清晰可见，，，我难道受诅咒了么！！！大神啊，大神啊，你快快粗线吧，小女子在这里感激涕零啦，，，谁能帮忙从小鼠组织中提取出高质量的DNA啊！！！组织量不是太多，20mg~100mg！！！！求指点现在只有这么多金币，先赊着好不
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Spideman，13-23
1楼 2014-03-06 13:01:14
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bealady

铜虫 (正式写手)
哪个好心人回复下啊帮忙下啊
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Spideman，13-23
2楼2014-03-07 20:53:55
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zswsyau

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
bealady: 金币+5, ★有帮助 2014-05-29 14:44:42
bealady: 金币+5, ★有帮助 2014-05-29 14:46:09
bealady: 金币+16 2014-05-29 14:46:14
关键是你为什么没有附上你的电泳结果图啊，我没法看见你的电泳图就很难帮你分析啊
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生命不息，奋斗不止！
3楼2014-05-28 09:21:55
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若溪

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
bealady: 金币+10, ★有帮助 2014-05-29 14:45:31
是不是楼主起始组织块太大，消化液相对少，组织里的细胞没有完全消化，DNA释放不完全啊？
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没有比脚更长的路，没有比人更高的山
4楼2014-05-28 10:18:36
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
bealady: 金币+10, ★有帮助 2014-05-29 14:45:51
转载：
一种快速提取小鼠组织ＤＮＡ的方法，其特征在于包括以下步骤：　（１）剪取小鼠尾巴末端或小鼠足趾置入试管内；　（２）向试管管内加入５０微升～２００微升、２０ｍＭ－２００ｍＭ的氢氧化钠溶液，并将试管置入ＰＣＲ仪器内，加热至９０℃～１０ ０℃并持续加热０．５～１．５小时；　（３）取出试管，加入１０微升、酸性的１Ｍ三羟甲基氨基甲烷溶液；　（４）剧烈震荡试管，至小鼠尾巴末端或小鼠足趾组织完全溶解；　（５）再将试管置入ＰＣＲ仪器内，离心分离５分钟，转速范围为５０ ００ｒｐｍ～１５０００ｒｐｍ；　（６）收集上清液，取１微升的上清液加入基因型的鉴定ＰＣＲ反应体系。
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
5楼2014-05-28 10:44:18
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bealady

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zswsyau at 2014-05-28 09:21:55
关键是你为什么没有附上你的电泳结果图啊，我没法看见你的电泳图就很难帮你分析啊

谢谢您啦，已解决
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Spideman，13-23
6楼2014-05-29 14:44:29
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bealady

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 若溪 at 2014-05-28 10:18:36
是不是楼主起始组织块太大，消化液相对少，组织里的细胞没有完全消化，DNA释放不完全啊？

应该是有这个原因的，多谢多谢
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Spideman，13-23
7楼2014-05-29 14:45:16
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hanqingccn

新虫 (初入文坛)
能给个QQ吗？交流一下。。互相学习，我的463654183，也是做小白鼠，喂东西，然后测核酸降解
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8楼2015-05-11 15:12:34
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