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落絮无声

新虫 (小有名气)

[求助] 公司返回DNA双向测序结果要怎么分析 已有3人参与

选用的两种引物是F-357和R-518,测序结果分别是:
F357方向是:
ACCGTATCATGGGGGCACCCTGATGGAGCACGCCGCGTGCAGGATGAAGGCCTTCGGGTTGTAAACTGCTTTTATTTGTGAGGAATATGACGGTAACAAATGAATAAGGGTCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATA
R518方向是:
GTGGACGACTTATTCTTTGTTACCGTCATATTCCTCACAAATAAAAGCAGTTTACAACCCGAAGGCCTTCATCCTGCACGCGGCGTTGCTCCATCAGGGTTGCCCCCATTGTGGAAGATTCCTCACTGCTGCCTCCCGTAGGATTA
请问用DNAMAN该如何分析,我是新手,请各位高手详细给讲一下,谢谢
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中丘子

捐助贵宾 (小有名气)


【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-21 09:57:41
同意楼上的意见,将产物克隆进T载体后再进行测序,这样就会好很多了
8楼2014-02-21 08:55:53
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
落絮无声(kx444555代发): 金币+3, 鼓励交流 2014-02-21 09:57:20
你确定这是双向测序后的全部序列?还是你自己过滤后的
请告知你的序列是如何获得的,模板序列是否已知等基本序列信息,好可进一步帮你分析
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2014-01-13 16:53:36
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落絮无声

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2014-01-13 16:53:36
你确定这是双向测序后的全部序列?还是你自己过滤后的
请告知你的序列是如何获得的,模板序列是否已知等基本序列信息,好可进一步帮你分析

对,这就是双向测序的结果,是测序公司直接反馈的结果,我没有过滤,我的长度大约在200bp左右
3楼2014-01-13 16:59:08
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
落絮无声(kx444555代发): 金币+3, 鼓励交流 2014-02-21 09:57:28
引用回帖:
3楼: Originally posted by 落絮无声 at 2014-01-13 16:59:08
对,这就是双向测序的结果,是测序公司直接反馈的结果,我没有过滤,我的长度大约在200bp左右...

将正反向的测序结果进行比对:
CLUSTAL 2.1 multiple sequence alignment


1               -----------------ACCGT-----ATC-------ATGGGGGCA-CCCTGATGGAGCA 30
2               TAATCCTACGGGAGGCAGCAGTGAGGAATCTTCCACAATGGGGGCAACCCTGATGGAGCA 60
                                  * **     ***       ********* *************

1               -CGCCGCGTGCAGGATGAAGGCCTTCGGGTTGTAAACTGCTTTTATTTGTGAGGAATATG 89
2               ACGCCGCGTGCAGGATGAAGGCCTTCGGGTTGTAAACTGCTTTTATTTGTGAGGAATATG 120
                 ***********************************************************

1               ACGGTAACAAATGAATAAGGGTCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATA 143
2               ACGGTAACAAA-GAATAA--GTCGTCCAC------------------------- 146
                *********** ******  **** * *                                                
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2014-01-13 17:07:53
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