应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菜鸟求助多肽SDS电泳的问题。。。。。。。。
91/1返回列表
查看: 1692  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

樱梦

铁虫 (小有名气)

[求助] 菜鸟求助多肽SDS电泳的问题。。。。。。。。 已有1人参与

我不是专业做蛋白的，只是在蛋白上改性高分子。。。最近在做一个多肽上改性高分子的反应，多肽分子量为3400左右，改性后为2万左右，但在跑SDS电泳时遇到问题就是用考马斯蓝染色后再脱色条带颜色非常浅，以至于凝胶成像系统拍不出来效果。以前做牛血清白蛋白（分子量67000左右）改性时染色脱色效果非常好，条带很清晰，为什么换多肽就不行了呢？而且上样的量也增加了几倍（每孔加了40微克了）。这种问题怎么解决呢？求问各位做蛋白的大侠们，谢谢了！！！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-12-30 17:11:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
樱梦: 金币+10, ★有帮助, 1 2013-12-30 17:19:39
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-31 08:37:16
你所指的该多肽在改性前后，经考玛斯亮蓝染色后是否都有条带，还是改性后没有，又或是都没有，如果改前有，那说明是多肽的问题，如果改前改后都没有，那说明是实验问题....
赞一下 回复此楼
生物化学与分子生物学
2楼2013-12-30 17:16:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

樱梦

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lidonghong at 2013-12-30 17:16:19
你所指的该多肽在改性前后，经考玛斯亮蓝染色后是否都有条带，还是改性后没有，又或是都没有，如果改前有，那说明是多肽的问题，如果改前改后都没有，那说明是实验问题....

多肽改性前后跑出的条带都很浅，用同样的条件跑BSA条带很好看的，不知道是不是染色的时候多肽扩散了呢？谢谢哈。。。
赞一下 回复此楼
3楼2013-12-30 17:19:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 樱梦 at 2013-12-30 17:19:21
多肽改性前后跑出的条带都很浅，用同样的条件跑BSA条带很好看的，不知道是不是染色的时候多肽扩散了呢？谢谢哈。。。...

多肽扩散不应该的啊！你在跑胶前多肽经过怎样的处理？
赞一下 回复此楼
生物化学与分子生物学
4楼2013-12-30 17:35:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

樱梦

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lidonghong at 2013-12-30 17:35:36
多肽扩散不应该的啊！你在跑胶前多肽经过怎样的处理？...

是买来的多肽直接跑的，是一种叫鲑鱼降钙素的多肽，还有一个是这种多肽接上聚合物的。。。请问配制样品的时候是直接和上样缓冲液液混合就可以了吗？是不是需要混合一定时间？多肽跑胶前要不要变性处理？
赞一下 回复此楼
5楼2013-12-30 20:09:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-31 08:37:20
知道考马斯亮蓝染色的原理是什么吧。小肽中这些效用氨基酸残基本身就比大蛋白少，加上聚合物后，聚合物不可能参与染色，只有原肽上的那些氨基酸残基在作用。还有可能可能是你的多肽里的赖氨酸、精氨酸残基本身就比较少。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2013-12-31 01:55:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 樱梦 at 2013-12-30 20:09:29
是买来的多肽直接跑的，是一种叫鲑鱼降钙素的多肽，还有一个是这种多肽接上聚合物的。。。请问配制样品的时候是直接和上样缓冲液液混合就可以了吗？是不是需要混合一定时间？多肽跑胶前要不要变性处理？...

混合后煮沸5min，变性处理，使之成为单链结构
赞一下 回复此楼
生物化学与分子生物学
7楼2013-12-31 12:09:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Allen206

银虫 (小有名气)
怎么改性的？结合的是什么聚合物？靠什么化学键结合的？你跑的什么胶啊？3.4k要用tricine吧？
赞一下 回复此楼
不想说什么，，，，
8楼2013-12-31 17:02:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三只金刚

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
9楼2018-10-10 10:14:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 樱梦 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 312求调剂 +7 陌宸希 2026-03-16 8/400 2026-03-18 09:54 by macy2011
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +5 慕寒mio 2026-03-16 5/250 2026-03-17 21:31 by hmn_wj
[考研] 268求调剂 +8 一定有学上- 2026-03-14 9/450 2026-03-17 17:47 by laoshidan
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +16 不知道叫什么！ 2026-03-15 18/900 2026-03-17 17:05 by ruiyingmiao
[考研] 26考研求调剂 +6 丶宏Sir 2026-03-13 6/300 2026-03-17 16:13 by 醉在风里
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +8 一鸭鸭哟 2026-03-14 10/500 2026-03-17 15:07 by 一鸭鸭哟
[考研] 290求调剂 +6 孔志浩 2026-03-12 11/550 2026-03-17 14:41 by 周舟舟77
[考研] 285化工学硕求调剂（081700） +9 柴郡猫_ 2026-03-12 9/450 2026-03-17 10:18 by Sammy2
[基金申请] 国自科面上基金字体 +6 iwuli 2026-03-12 7/350 2026-03-16 21:18 by sculhf
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 321求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 311求调剂 +5 26研0 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:21 by a不易
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +7 Ncdx123456 2026-03-13 8/400 2026-03-16 12:15 by karry wen
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 招收0805（材料）调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭