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免疫2012

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS电泳，急求大神帮助！！！

大家好！最近SDS电泳遇到点问题，为什么mark总是比样品跑的慢啊？浓缩胶是5%的，分离胶是10%的，比如说那张已脱色的图片，mark的第三个条带代表分子量44300，而它旁边的样品的分子量应该在45000，按理说应该在mark第三条条带稍稍偏上方一点的，可是由于跑胶时mark本身跑得慢，结果偏下方一点了。
   附上图片 有哪位高手可以指点指点吗？谢谢你们了！！！
SDS电泳，急求大神帮助！！！
IMG_20131024_144427.jpg


SDS电泳，急求大神帮助！！！-1
IMG_20131023_204401.jpg
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希望自己顺利毕业 有所收获
1楼 2013-10-24 15:09:08
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ljsh

铁杆木虫 (著名写手)
★
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2013-10-24 18:57:35
marker总是比样品跑的慢? are you sure?
如果怀疑marker , 换个marker试试。
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2楼2013-10-24 15:34:58
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免疫2012

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ljsh at 2013-10-24 15:34:58
marker总是比样品跑的慢? are you sure?
如果怀疑marker , 换个marker试试。

对啊，最近几次都是这样，那个marker是0.6ug/ul的，建议每次用量5ug/ul，我每次都是上样10ug/ul的。我也不知道怎么回事了，也正在考虑换个marker。谢谢你哈
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希望自己顺利毕业 有所收获
3楼2013-10-24 15:54:22
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storm26

禁虫 (小有名气)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-25 15:48:54
本帖内容被屏蔽
4楼2013-10-24 20:40:06
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storm26

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
5楼2013-10-24 20:43:26
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免疫2012

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by storm26 at 2013-10-24 20:40:06
条带跑得还比较漂亮！实测分子量有偏差的可能原因比较多。
1. 几个蛋白的分子量均较大，应尝试更低浓度的分离胶。
2. 把蛋白和marker上样量降低，将条带变得更细，获得的分子量才能准。你样品条带都很粗。
3. &q ...

嗯，昨天我又跑了一次，样品浓度降低了，条带的确更细更好看了。至于marker的问题还是存在，所以现在在考虑换一新的marker试试。不过您给分析的好全面，真的很感谢哈！
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希望自己顺利毕业 有所收获
6楼2013-10-25 15:32:14
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qinyy

新虫 (初入文坛)
可以上样是少上点，后者是你的 最下面可能有气泡
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7楼2013-10-25 16:33:53
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免疫2012

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by qinyy at 2013-10-25 16:33:53
可以上样是少上点，后者是你的 最下面可能有气泡

“后者是你的 最下面可能有起泡”没懂什么意思哎
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希望自己顺利毕业 有所收获
8楼2013-10-25 17:12:49
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