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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS电泳 求大神帮助 啊！
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免疫2012

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS电泳 求大神帮助 啊！ 已有1人参与

大神们 我又来了 电泳还是做不好啊
上次也传了两张照片 一直存在marker比样品跑得慢的问题 今天刚换了一个新的marker试了一下 你们看 这还是不行哎。。。
第一、第四条都是marker  这明显还是跑得比旁边的样品慢 虽然我还没染色没脱色 可是我对这次跑的结果已经不抱希望了
请问大神们 你们跑电泳如果结果好的话是不是每次marker跟样品都在一条线上啊？？？求帮助求原因 我的样品应该是没问题的了

SDS电泳 求大神帮助 啊！
IMG_20131031_132822.jpg


SDS电泳 求大神帮助 啊！-1
IMG_20131031_141758.jpg
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希望自己顺利毕业 有所收获
1楼 2013-10-31 14:30:14
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Dong_Ni

金虫 (小有名气)

药师

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不一定必须齐，看分子量。

[ 发自小木虫客户端 ]
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全力以赴，否则一无所有
2楼2013-10-31 14:43:01
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myprayer

专家顾问 (著名写手)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-10-31 16:09:44
电泳结束后，取胶放入双蒸水或去离子水中，延长洗涤时间或增加洗涤次数。
DS及盐类等杂质未除尽
电泳结束后，取胶放入双蒸水或去离子水中，延长洗涤时间或增加洗涤次数
建议使用厚度小于1mm的凝胶；每次的洗涤时间需加长。
建议在电泳时加两个不同量的BSA，并将此两个泳道作为阳性对照。
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3楼2013-10-31 14:46:01
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免疫2012

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Dong_Ni at 2013-10-31 14:43:01
不一定必须齐，看分子量。

可是脱色过后的结果也不对呢 现在正染色呢 估计这次也还是不行 不过谢谢你的回复哈
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希望自己顺利毕业 有所收获
4楼2013-10-31 15:11:11
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免疫2012

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by myprayer at 2013-10-31 14:46:01
电泳结束后，取胶放入双蒸水或去离子水中，延长洗涤时间或增加洗涤次数。
DS及盐类等杂质未除尽
电泳结束后，取胶放入双蒸水或去离子水中，延长洗涤时间或增加洗涤次数
建议使用厚度小于1mm的凝胶；每次的洗涤 ...

额 刚把凝胶放进去染色 没有看到你的回复 也没有用超纯水清洗 呵呵 不过谢谢你哈 我再琢磨琢磨 你们每次做电泳 跑样的时候marker 与样品在一条线上吗？我每次marker 跑的速度都比较慢呢
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希望自己顺利毕业 有所收获
5楼2013-10-31 15:13:42
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1059263588

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

不一定一样齐，有的时候也不一样，看样品吧
你要是每次不同的样品都这样的话，就看看是不是胶配的有问题，或者电极缓冲液有没有问题，或者是你的loading buffer，原因会出现在很多地方
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6楼2013-11-27 17:09:01
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郭兜兜

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是不是胶的问题啊
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7楼2013-12-02 10:26:23
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
胶或者缓冲液以及样本loadingbuffer的PH与marker的PH不一样可能会导致这种情况吧，又或者是浓度差异太大了？
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金币是赌出来的
8楼2013-12-02 16:26:45
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wfk20008

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也同意楼上几位的看法，我这几天也在做，marker肯定不一定会出现跟我们要的目的条带同步的，我们要的目的蛋白不一定在marker上会有显示，你 查一下你的蛋白的分子量，然后看marker上的各种条带分别代表的分子量，就可以大概看出你的条带应该是在哪里了
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9楼2013-12-02 20:32:35
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

必须四度里面跑电泳吗？
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踏实
10楼2014-12-02 10:50:22
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