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quanquan1101

新虫 (小有名气)

[交流] RNA提取结果，谁能帮我分析下 已有14人参与

RNA提取结果如下，请问这样是降解了吗？可以做反转录吗？RNA可以放在-20℃的冰箱保存吗？
RNA提取结果，谁能帮我分析下
IMG_0035_副本.jpg

[ Last edited by quanquan1101 on 2013-12-30 at 17:10 ]
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1楼 2013-12-30 17:08:59
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

xudabin98

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-12-31 00:49:11
你提取这个做反转录是可以的，但一定要用DNase消化DNA，否则对你结果影响太大。看看我曾经提取的RNA，有问题随时交流http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=5191776
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10楼2013-12-30 20:04:26
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普通回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-30 18:00:55
嗯，还是有三条带嘛!这个情况作逆转录应该是没问题的！
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生物化学与分子生物学
2楼2013-12-30 17:18:35
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-31 00:48:45
有些降解了，不过做逆转录是可以的。RNA尽量放在-80°C，减少冻融次数。最好是提完后当天就做逆转录。
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3楼2013-12-30 17:54:29
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小星丹925

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-31 00:48:53
建议你提完RNA后测下浓度跟OD260：280在1.8-2.0之间 RNA差不多就可以反转，在注意下浓度跟自己的RNA体积，是否够用，看你的图 RNA提的还挺好的，不知道你的胶时不是用DEPC处理水配的，还有电泳液也要用DEPC处理水配的TAE才好，效果才明显

而且最好立即反转 不要存，容易降解
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莫听穿林打叶声，何妨吟啸且徐行。竹杖芒鞋轻胜马， 谁怕？一蓑烟雨任平生。
4楼2013-12-30 18:39:55
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狼行成单

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-31 00:48:59
能看清楚三条带，不过确实部分降解第一条带和第二条的亮度比值好像不是太好，如果要求不高可以做RT，RNA最好还是放-80℃，减少反复冻融，短时间可以放-20℃
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If you feel good，doit！
5楼2013-12-30 19:21:19
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quanquan1101

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lidonghong at 2013-12-30 17:18:35
嗯，还是有三条带嘛!这个情况作逆转录应该是没问题的！

谢谢
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6楼2013-12-30 19:50:16
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quanquan1101

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-30 17:54:29
有些降解了，不过做逆转录是可以的。RNA尽量放在-80°C，减少冻融次数。最好是提完后当天就做逆转录。

谢谢
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7楼2013-12-30 19:50:30
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quanquan1101

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小星丹925 at 2013-12-30 18:39:55
建议你提完RNA后测下浓度跟OD260：280在1.8-2.0之间 RNA差不多就可以反转，在注意下浓度跟自己的RNA体积，是否够用，看你的图 RNA提的还挺好的，不知道你的胶时不是用DEPC处理水配的，还有电泳液也要用DEPC处理水配 ...

谢谢
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8楼2013-12-30 19:50:55
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quanquan1101

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 狼行成单 at 2013-12-30 19:21:19
能看清楚三条带，不过确实部分降解第一条带和第二条的亮度比值好像不是太好，如果要求不高可以做RT，RNA最好还是放-80℃，减少反复冻融，短时间可以放-20℃

谢谢
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9楼2013-12-30 19:51:13
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