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quanquan1101

新虫 (小有名气)

[交流] RNA提取结果,谁能帮我分析下已有14人参与

RNA提取结果如下,请问这样是降解了吗?可以做反转录吗?RNA可以放在-20℃的冰箱保存吗?
RNA提取结果,谁能帮我分析下
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[ Last edited by quanquan1101 on 2013-12-30 at 17:10 ]
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xudabin98

木虫 (正式写手)

★ ★
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gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2013-12-31 00:49:11
你提取这个做反转录是可以的,但一定要用DNase消化DNA,否则对你结果影响太大。看看我曾经提取的RNA,有问题随时交流http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=5191776
10楼2013-12-30 20:04:26
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普通回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-30 18:00:55
嗯,还是有三条带嘛!这个情况作逆转录应该是没问题的!
生物化学与分子生物学
2楼2013-12-30 17:18:35
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-31 00:48:45
有些降解了,不过做逆转录是可以的。RNA尽量放在-80°C,减少冻融次数。最好是提完后当天就做逆转录。
3楼2013-12-30 17:54:29
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小星丹925

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-31 00:48:53
建议你提完RNA后测下浓度跟OD260:280在1.8-2.0之间 RNA差不多就可以反转,在注意下浓度跟自己的RNA体积,是否够用,看你的图 RNA提的还挺好的,不知道你的胶时不是用DEPC处理水配的,还有电泳液也要用DEPC处理水配的TAE才好,效果才明显

而且最好立即反转 不要存,容易降解
莫听穿林打叶声,何妨吟啸且徐行。竹杖芒鞋轻胜马, 谁怕?一蓑烟雨任平生。
4楼2013-12-30 18:39:55
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狼行成单

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-31 00:48:59
能看清楚三条带,不过确实部分降解第一条带和第二条的亮度比值好像不是太好,如果要求不高可以做RT,RNA最好还是放-80℃,减少反复冻融,短时间可以放-20℃
If you feel good,doit!
5楼2013-12-30 19:21:19
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quanquan1101

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lidonghong at 2013-12-30 17:18:35
嗯,还是有三条带嘛!这个情况作逆转录应该是没问题的!

谢谢
6楼2013-12-30 19:50:16
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quanquan1101

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-30 17:54:29
有些降解了,不过做逆转录是可以的。RNA尽量放在-80°C,减少冻融次数。最好是提完后当天就做逆转录。

谢谢
7楼2013-12-30 19:50:30
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quanquan1101

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 小星丹925 at 2013-12-30 18:39:55
建议你提完RNA后测下浓度跟OD260:280在1.8-2.0之间 RNA差不多就可以反转,在注意下浓度跟自己的RNA体积,是否够用,看你的图 RNA提的还挺好的,不知道你的胶时不是用DEPC处理水配的,还有电泳液也要用DEPC处理水配 ...

谢谢
8楼2013-12-30 19:50:55
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quanquan1101

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 狼行成单 at 2013-12-30 19:21:19
能看清楚三条带,不过确实部分降解第一条带和第二条的亮度比值好像不是太好,如果要求不高可以做RT,RNA最好还是放-80℃,减少反复冻融,短时间可以放-20℃

谢谢
9楼2013-12-30 19:51:13
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