应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助：RNA提取
81/1返回列表
查看: 1405  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

安安90

木虫 (小有名气)

[求助] 求助：RNA提取

求助：今天提取的RNA260/280在1.95-2.05之内，但是260/230有的1.2-1.4，也有的是1.9-2.2，接下来要进行反转录做相对荧光定量，这可以用吗？O(∩_∩)O谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
我的未来不是梦！
1楼 2013-11-12 20:45:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xipha

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-11-13 12:39:52
不确定楼主提取的是总RNA还是什么，但是以定量PCR而论，我记得我们组之前都不大看OD的，因为如果提出来质量不好的RNA 测OD也有可能正常。一般需要跑个电泳，用聚丙烯酰胺胶（分辨率比较高，琼脂糖应该也可以吧），只要分离相，TBE制胶TBE缓冲，上样孔看看蛋白多不多，RNA完整不完整（这个最重要），有没有分解的现象。好的RNA一般是一条连续的亮带，根据物种不同，核糖体RNA有一个亮度比例，一般电泳跑出来条带不正常的做实验常常会得到错误的结果。这个很久没做了，细节都忘光光了，不过应该可以查得到，希望有帮助。
赞一下 回复此楼
2楼2013-11-13 02:33:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zuoqi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-11-14 23:20:10
重点看28s和18s两条带的亮度是否为2：1，符合了这个比例，而且5s很少就可以了。
赞一下 回复此楼
3楼2013-11-13 06:16:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

安安90

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xipha at 2013-11-13 02:33:03
不确定楼主提取的是总RNA还是什么，但是以定量PCR而论，我记得我们组之前都不大看OD的，因为如果提出来质量不好的RNA 测OD也有可能正常。一般需要跑个电泳，用聚丙烯酰胺胶（分辨率比较高，琼脂糖应该也可以吧），只 ...

提的是总RNA
回复此楼
我的未来不是梦！
4楼2013-11-13 10:56:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

安安90

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zuoqi at 2013-11-13 06:16:09
重点看28s和18s两条带的亮度是否为2：1，符合了这个比例，而且5s很少就可以了。

琼脂糖凝胶电泳图不太好
赞一下 回复此楼
我的未来不是梦！
5楼2013-11-13 10:56:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

N323

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-14 23:20:21
肯定会影响扩增效率，最好纯化一下！我之前做荧光定量提起RNA时，左后用RNAase free wanter 溶解。不用试剂盒里。只是建议！
赞一下 回复此楼
学无止境
6楼2013-11-13 13:45:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

安安90

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by N323 at 2013-11-13 13:45:32
肯定会影响扩增效率，最好纯化一下！我之前做荧光定量提起RNA时，左后用RNAase free wanter 溶解。不用试剂盒里。只是建议！

怎么纯化啊?具体怎么做啊?
赞一下 回复此楼
我的未来不是梦！
7楼2013-11-13 14:17:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liujianmin68

木虫 (职业作家)

努力发展交叉学科

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-14 23:20:34
你提取的RNA260/280在1.95-2.05之间是比较好的，其它参数不太重要。RNA提完一定要跑电泳看看，如果18S\28S或者23S\16S条带清晰并较好分开，就可以顺利进行逆转录实验。
祝你实验成功。
赞一下(1人) 回复此楼
转向地质微生物学
8楼2013-11-14 19:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 安安90 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +9 drizzle_9 2026-04-12 10/500 2026-04-12 14:51 by drizzle_9
[考研] 化学工程调剂289 +44 yang婷 2026-04-07 50/2500 2026-04-12 02:36 by 秋豆菜芽
[考研] 计算机22408 281分，求调剂 +7 17715607211 2026-04-06 7/350 2026-04-12 00:43 by xuxiang
[考研] 26自然地理学303分求调剂 +6 一战成硕啊啊啊� 2026-04-06 11/550 2026-04-11 21:27 by 裴宏伟
[考研] 284求调剂 +11 archer.. 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:23 by 蓝云思雨
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +11 LZH（等待调剂中 2026-04-10 11/550 2026-04-11 08:39 by zhq0425
[考研] 吉大计算机技术331分，英语六级，求调剂 +3 峰峰021116 2026-04-09 3/150 2026-04-10 20:01 by chemisry
[考研] 本9 一志愿西工大085601 324求调剂 +5 wysyjs25 2026-04-10 5/250 2026-04-10 16:57 by luoyongfeng
[考研] 调剂申请086000一志愿西北农林科技大学生物与医药320分-本科齐鲁工业大学 +3 美美女士 2026-04-09 3/150 2026-04-10 10:31 by liuhuiying09
[考研] 江苏大学 工科调剂 捡漏 +3 Evan_Liu 2026-04-09 5/250 2026-04-10 10:22 by Evan_Liu
[考研] 347材料专硕求调剂 +19 zj8215216 2026-04-06 19/950 2026-04-10 09:36 by 690616278
[考研] 1U盾记得记得就 +9 sanjin020722 2026-04-08 10/500 2026-04-09 14:11 by 诗与自由
[考研] 265求调剂 +4 风说她早忘了 2026-04-07 4/200 2026-04-09 13:59 by only周
[考研] 0703化学调剂 348分 +14 唉我超真没招了 2026-04-06 15/750 2026-04-08 19:16 by 我减肥1
[考研] 326分，一志愿沪9，求生物学调剂 +4 刘墨墨 2026-04-05 4/200 2026-04-08 06:22 by lijunpoly
[考研] 一志愿西电085401求调剂 +4 sunw1306 2026-04-07 4/200 2026-04-07 16:40 by 啵啵啵0119
[考研] 328求调剂 +4 ghhh88888 2026-04-06 5/250 2026-04-07 14:45 by ghhh88888
[考研] 333求调剂 +6 合乘杨习夕 2026-04-06 6/300 2026-04-07 09:44 by 猪会飞
[考研] 生物学学硕求调剂：351分一志愿南京师范大学生物学专业 +6 …～、王…～ 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:54 by macy2011
[考研] 材料调剂 +5 小刘同学吖吖 2026-04-06 5/250 2026-04-06 18:34 by sherry_1901
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭