24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 1259  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

安安90

木虫 (小有名气)

[求助] 求助:RNA提取

求助:今天提取的RNA260/280在1.95-2.05之内,但是260/230有的1.2-1.4,也有的是1.9-2.2,接下来要进行反转录做相对荧光定量,这可以用吗?O(∩_∩)O谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

我的未来不是梦!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zuoqi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2013-11-14 23:20:10
重点看28s和18s两条带的亮度是否为2:1,符合了这个比例,而且5s很少就可以了。
3楼2013-11-13 06:16:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

xipha

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-11-13 12:39:52
不确定楼主提取的是总RNA还是什么,但是以定量PCR而论,我记得我们组之前都不大看OD的,因为如果提出来质量不好的RNA 测OD也有可能正常。一般需要跑个电泳,用聚丙烯酰胺胶(分辨率比较高,琼脂糖应该也可以吧),只要分离相,TBE制胶TBE缓冲,上样孔看看蛋白多不多,RNA完整不完整(这个最重要),有没有分解的现象。好的RNA一般是一条连续的亮带,根据物种不同,核糖体RNA有一个亮度比例,一般电泳跑出来条带不正常的做实验常常会得到错误的结果。这个很久没做了,细节都忘光光了,不过应该可以查得到,希望有帮助。
2楼2013-11-13 02:33:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

安安90

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xipha at 2013-11-13 02:33:03
不确定楼主提取的是总RNA还是什么,但是以定量PCR而论,我记得我们组之前都不大看OD的,因为如果提出来质量不好的RNA 测OD也有可能正常。一般需要跑个电泳,用聚丙烯酰胺胶(分辨率比较高,琼脂糖应该也可以吧),只 ...

提的是总RNA
我的未来不是梦!
4楼2013-11-13 10:56:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

安安90

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zuoqi at 2013-11-13 06:16:09
重点看28s和18s两条带的亮度是否为2:1,符合了这个比例,而且5s很少就可以了。

琼脂糖凝胶电泳图不太好
我的未来不是梦!
5楼2013-11-13 10:56:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见