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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA提取结果，谁能帮我分析下
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梁顺涛

金虫 (小有名气)
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-31 14:14:34
完整的，未降解的RNA制品电泳图谱可以清洗的看到18S ,28S,5S三条带，且28S的亮度应该为18S的两倍，5S的没有不影响。
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11楼2013-12-31 09:00:06
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意萧02

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主还是很牛的，好好加油，必能成功
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12楼2013-12-31 09:22:04
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yangjianchen

铜虫 (小有名气)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-12-31 14:14:47
降解有点严重哦，不过做一般的实验要求不高的话应该没问题。
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13楼2013-12-31 10:29:42
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achonghello

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-12-31 14:14:54
提的质量还是挺高的
但是感觉RNA不能长时间放-20，一般不要超过五个小时。。。
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14楼2013-12-31 13:56:27
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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4楼: Originally posted by 小星丹925 at 2013-12-30 18:39:55
建议你提完RNA后测下浓度跟OD260：280在1.8-2.0之间 RNA差不多就可以反转，在注意下浓度跟自己的RNA体积，是否够用，看你的图 RNA提的还挺好的，不知道你的胶时不是用DEPC处理水配的，还有电泳液也要用DEPC处理水配 ...

原来你也在哈 对了 我一直在找我的RNA降解情况 我的都是没有用DEPC处理的 结果跑来降解很严重啊 现在基本都是在不用DEPC处理的情况下跑胶，能做到楼主的照片 马马虎虎就能用，你们的TAE也是用DEPC处理的？
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生命不息奋斗不止
15楼2013-12-31 15:40:26
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)
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8楼: Originally posted by quanquan1101 at 2013-12-30 19:50:55
谢谢...

你好 大侠 你们OD值要测？我们老师说 OD值只在一个很小的范围内是准确的大约是0.1左右 多以后期我都没有用OD值来测定了 不知道是否正确
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生命不息奋斗不止
16楼2013-12-31 15:46:32
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)
做反转没问题，请问楼主 你的胶以及缓冲液是用DEPC水处理过么？还是直接用一般的缓冲液配胶？以及电泳？
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生命不息奋斗不止
17楼2013-12-31 15:48:40
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yangjianchen

铜虫 (小有名气)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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11楼: Originally posted by 梁顺涛 at 2013-12-31 09:00:06
完整的，未降解的RNA制品电泳图谱可以清洗的看到18S ,28S,5S三条带，且28S的亮度应该为18S的两倍，5S的没有不影响。

在变性胶上才会出现“28S的亮度应该为18S的两倍”，一般5S特别亮的降解比较厉害啊，一般情况下28S和18S的都不会多两
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18楼2013-12-31 17:07:20
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小星丹925

木虫 (著名写手)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-31 23:52:08
引用回帖:
15楼: Originally posted by 冷雁孤旅 at 2013-12-31 15:40:26
原来你也在哈 对了 我一直在找我的RNA降解情况 我的都是没有用DEPC处理的 结果跑来降解很严重啊 现在基本都是在不用DEPC处理的情况下跑胶，能做到楼主的照片 马马虎虎就能用，你们的TAE也是用DEPC处理的？...

我们提RNA 跑的胶是用DEPC处理水加TAE配的，就是DEPC水灭活后代替蒸馏水，我跑胶的效果还行，楼主的照片不知道是不是有用DEPC处理水配的TAE，嘻嘻
而且我们跑RAN的电泳槽跟胶板梳子什么的都是单独的，不跟跑DNA的混用，最初的时候他们都好像有特意处理过……
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莫听穿林打叶声，何妨吟啸且徐行。竹杖芒鞋轻胜马， 谁怕？一蓑烟雨任平生。
19楼2013-12-31 20:33:48
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
19楼: Originally posted by 小星丹925 at 2013-12-31 20:33:48
我们提RNA 跑的胶是用DEPC处理水加TAE配的，就是DEPC水灭活后代替蒸馏水，我跑胶的效果还行，楼主的照片不知道是不是有用DEPC处理水配的TAE，嘻嘻
而且我们跑RAN的电泳槽跟胶板梳子什么的都是单独的，不跟跑DNA的 ...

哦 这样啊   我们全部是混用  在室外用的  所以提取RNA效果一直不理想 过几天用DEPC去溶解RNA，看是因为提取的时候降解咱主要因素还是电泳的时候占主要因素。这几天效果如何做的？
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生命不息奋斗不止
20楼2013-12-31 20:58:09
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