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梁顺涛

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-31 14:14:34
完整的,未降解的RNA制品电泳图谱可以清洗的看到18S ,28S,5S三条带,且28S的亮度应该为18S的两倍,5S的没有不影响。
11楼2013-12-31 09:00:06
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意萧02

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主还是很牛的,好好加油,必能成功
12楼2013-12-31 09:22:04
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yangjianchen

铜虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2013-12-31 14:14:47
降解有点严重哦,不过做一般的实验要求不高的话应该没问题。
13楼2013-12-31 10:29:42
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achonghello

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2013-12-31 14:14:54
提的质量还是挺高的
但是感觉RNA不能长时间放-20,一般不要超过五个小时。。。
14楼2013-12-31 13:56:27
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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4楼: Originally posted by 小星丹925 at 2013-12-30 18:39:55
建议你提完RNA后测下浓度跟OD260:280在1.8-2.0之间 RNA差不多就可以反转,在注意下浓度跟自己的RNA体积,是否够用,看你的图 RNA提的还挺好的,不知道你的胶时不是用DEPC处理水配的,还有电泳液也要用DEPC处理水配 ...

原来你也在哈 对了 我一直在找我的RNA降解情况 我的都是没有用DEPC处理的 结果跑来降解很严重啊 现在基本都是在不用DEPC处理的情况下跑胶,能做到楼主的照片 马马虎虎就能用,你们的TAE也是用DEPC处理的?
生命不息奋斗不止
15楼2013-12-31 15:40:26
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)


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8楼: Originally posted by quanquan1101 at 2013-12-30 19:50:55
谢谢...

你好 大侠 你们OD值要测?我们老师说 OD值只在一个很小的范围内是准确的大约是0.1左右 多以后期我都没有用OD值来测定了 不知道是否正确
生命不息奋斗不止
16楼2013-12-31 15:46:32
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)

做反转没问题,请问楼主 你的胶以及缓冲液是用DEPC水处理过么?还是直接用一般的缓冲液配胶?以及电泳?
生命不息奋斗不止
17楼2013-12-31 15:48:40
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yangjianchen

铜虫 (小有名气)


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引用回帖:
11楼: Originally posted by 梁顺涛 at 2013-12-31 09:00:06
完整的,未降解的RNA制品电泳图谱可以清洗的看到18S ,28S,5S三条带,且28S的亮度应该为18S的两倍,5S的没有不影响。

在变性胶上才会出现“28S的亮度应该为18S的两倍”,一般5S特别亮的降解比较厉害啊,一般情况下28S和18S的都不会多两
18楼2013-12-31 17:07:20
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小星丹925

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-31 23:52:08
引用回帖:
15楼: Originally posted by 冷雁孤旅 at 2013-12-31 15:40:26
原来你也在哈 对了 我一直在找我的RNA降解情况 我的都是没有用DEPC处理的 结果跑来降解很严重啊 现在基本都是在不用DEPC处理的情况下跑胶,能做到楼主的照片 马马虎虎就能用,你们的TAE也是用DEPC处理的?...

我们提RNA 跑的胶是用DEPC处理水加TAE配的,就是DEPC水灭活后代替蒸馏水,我跑胶的效果还行,楼主的照片不知道是不是有用DEPC处理水配的TAE,嘻嘻
而且我们跑RAN的电泳槽跟胶板梳子什么的都是单独的,不跟跑DNA的混用,最初的时候他们都好像有特意处理过……
莫听穿林打叶声,何妨吟啸且徐行。竹杖芒鞋轻胜马, 谁怕?一蓑烟雨任平生。
19楼2013-12-31 20:33:48
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
19楼: Originally posted by 小星丹925 at 2013-12-31 20:33:48
我们提RNA 跑的胶是用DEPC处理水加TAE配的,就是DEPC水灭活后代替蒸馏水,我跑胶的效果还行,楼主的照片不知道是不是有用DEPC处理水配的TAE,嘻嘻
而且我们跑RAN的电泳槽跟胶板梳子什么的都是单独的,不跟跑DNA的 ...

哦 这样啊   我们全部是混用  在室外用的  所以提取RNA效果一直不理想 过几天用DEPC去溶解RNA,看是因为提取的时候降解咱主要因素还是电泳的时候占主要因素。这几天效果如何做的?
生命不息奋斗不止
20楼2013-12-31 20:58:09
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