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taipin345

铜虫 (小有名气)

[求助] 胰蛋白酶水解蛋白水解度很低 已有5人参与

小弟最近在做微波辅助胰蛋白酶水解蛋白的实验,发现水解度很低,一直上不去,试过提高温度和pH的方法。可是水解度依然很低,而且随着pH的增加水解度竟然也提高了,到了pH10的水解度竟然比8的还要高很多,这是怎么回事呢?不是文献上说胰蛋白酶的最适pH在8左右吗?
我才用的是pH-Stat方法测定水解度,如果我想做一个分步水解的酶解,用什么方法测定水解度比较好呢?
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meimei070517

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问你的问题解决了吗,我测出来水解度也非常低。我的是胰蛋白酶37℃,是否应该提高温度呢?
每一步都要踏实地走~~
11楼2017-01-14 12:18:13
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meimei070517

金虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by taipin345 at 2017-01-14 15:54:42
恩,我是用的0.01左右的碱测定的,你可以试试。
温度的话,你可以提高一下试试,因为我用的是微波,所以温度是在50左右的...

谢谢。不过我也是用的0.01M的碱滴定,但用量体积非常小(几百微升),计算出来水解度仍很低。我提蛋白的时候用到了PEG-8000,不知道是不是有这个影响因素。
每一步都要踏实地走~~
13楼2017-01-14 16:28:29
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