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天马0825

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[求助] 毕赤酵母表达问题已有2人参与

各位虫友，我用的是毕赤酵母Gs115表达外源蛋白，载体是pPIC9K，第一次筛选时选得两株株表达量高的，但是斜面保藏后，再进行表达时，发现表达量急剧减少，重复好几次都是，表达量没起始的高，都快一个月了，求大神指点。。。。。

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自信加努力成就人生

1楼 2013-12-12 10:29:43

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天马0825

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引用回帖:

5楼: Originally posted by achillesyao at 2013-12-16 17:16:48
pPIC9K不是氨苄青霉素吗？转进染色体也会丢失，因为那不是它们生长必须的。挑出来的所谓单克隆，其实有很多假阳性菌聚在阳性菌的周围，一旦条件回复，菌种就有可能退化。那你的培养基是不是筛选培养基？...

你好，是有氨苄抗性，那是在大肠里，在酵母里，靠的是组氨酸缺陷型筛选！