24小时热门版块排行榜    

查看: 1921  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

天马0825

银虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母表达问题 已有2人参与

各位虫友,我用的是毕赤酵母Gs115表达外源蛋白,载体是pPIC9K,第一次筛选时选得两株株表达量高的,但是斜面保藏后,再进行表达时,发现表达量急剧减少,重复好几次都是,表达量没起始的高,都快一个月了,求大神指点。。。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

自信加努力成就人生
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

achillesyao

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是保藏过程中的问题,为什么用斜面保存不用甘油种。斜面容易退化,保藏的培养基是否有加抗生素?可以拿高浓度抗生素的培养基重新筛选试试。
3楼2013-12-13 16:36:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

天马0825

银虫 (小有名气)

没人应答  自己先顶一下
自信加努力成就人生
2楼2013-12-13 08:51:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天马0825

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by achillesyao at 2013-12-13 16:36:53
是保藏过程中的问题,为什么用斜面保存不用甘油种。斜面容易退化,保藏的培养基是否有加抗生素?可以拿高浓度抗生素的培养基重新筛选试试。

谢谢!斜面保藏主要是使用时方便,还有就是重组酵母是基因重组到染色体上的,应该很稳定,载体使用的是缺陷型筛选,不用添加抗生素的。
自信加努力成就人生
4楼2013-12-16 13:27:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

achillesyao

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 天马0825 at 2013-12-16 13:27:55
谢谢!斜面保藏主要是使用时方便,还有就是重组酵母是基因重组到染色体上的,应该很稳定,载体使用的是缺陷型筛选,不用添加抗生素的。...

pPIC9K不是氨苄青霉素吗?转进染色体也会丢失,因为那不是它们生长必须的。挑出来的所谓单克隆,其实有很多假阳性菌聚在阳性菌的周围,一旦条件回复,菌种就有可能退化。那你的培养基是不是筛选培养基?
5楼2013-12-16 17:16:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +3 启萌科技 2026-08-12 11/550 2026-08-13 22:57 by 启萌科技
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +9 Tide man 2026-08-10 10/500 2026-08-13 20:33 by 温淼淼淼
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 28/1400 2026-08-13 17:51 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
请填处理意见