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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于毕赤酵母胞内表达破壁的问题
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jia1012428

铜虫 (小有名气)

[交流] 关于毕赤酵母胞内表达破壁的问题

我看了p.p的操作手册，配方是50 mM sodium phosphate, pH 7.4、1 mM PMSF、1 mM EDTA、5% glycerol。我的酶对PMSF和EDTA都敏感，可不可以不加，对酶有影响么？
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1楼 2012-04-27 11:16:15
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jia1012428

铜虫 (小有名气)
自己顶一下吧。
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2楼2012-04-27 19:19:21
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sesame_oil

荣誉版主 (文坛精英)
★
jia1012428(金币+3): 谢谢参与
这个不明白
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3楼2012-04-27 20:05:03
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userhung

禁虫 (文学泰斗)
★
jia1012428(金币+3): 谢谢参与
做一下看看不就知道了，祝福好运~~~~~~~~~~
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4楼2012-04-27 20:08:29
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xhjggl

木虫 (正式写手)
★
jia1012428(金币+3): 谢谢参与
可以使用一步法酵母活性蛋白提取试剂盒   BSP026
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5楼2012-04-27 20:22:23
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喜马拉雅山

铁虫 (初入文坛)
★
jia1012428(金币+3): 谢谢参与
没做过，顶一下
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6楼2012-04-28 00:22:53
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Scifinder2

银虫 (著名写手)
★
jia1012428(金币+3): 谢谢参与
Good luck to you.
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7楼2012-04-28 01:11:37
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zx6291

铜虫 (小有名气)
★
jia1012428(金币+3): 谢谢参与
应该没有问题，不加的话，可以超声破碎
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8楼2012-04-28 08:55:01
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ben1147

木虫 (正式写手)
★
jia1012428(金币+3): 谢谢参与
EDTA不行，EGTA呢？
PMSF不行的话最好拿别的蛋白酶抑制剂代替吧
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9楼2012-04-28 09:39:21
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boying0928

至尊木虫 (著名写手)
★
jia1012428(金币+3): 谢谢参与
可以不加抑制剂，但是超声不行，酵母有细胞壁，可以用物理破碎的方法。
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10楼2012-04-28 22:21:24
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jia1012428

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by boying0928 at 2012-04-28 22:21:24:
可以不加抑制剂，但是超声不行，酵母有细胞壁，可以用物理破碎的方法。

哥们，我用酸洗玻璃珠破壁了，能破开，但是效果不好。请问你有什么好方法么？
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11楼2012-04-30 15:43:04
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chengjg

木虫 (正式写手)
★
jia1012428(金币+3): 谢谢参与
超声功率600W、冰浴条件是可以的。间歇时间长一点没问题
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12楼2012-05-01 10:51:00
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漫游寄畅园

木虫 (小有名气)
★
jia1012428(金币+3): 谢谢参与

换成别的酶抑制剂
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13楼2013-12-16 17:08:17
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