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jia1012428

铜虫 (小有名气)

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[交流] 关于毕赤酵母胞内表达破壁的问题

我看了p.p的操作手册，配方是50 mM sodium phosphate, pH 7.4、1 mM PMSF、1 mM EDTA、5% glycerol。我的酶对PMSF和EDTA都敏感，可不可以不加，对酶有影响么？

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1楼 2012-04-27 11:16:15

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jia1012428

铜虫 (小有名气)

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自己顶一下吧。

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2楼2012-04-27 19:19:21

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sesame_oil

荣誉版主 (文坛精英)

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这个不明白

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3楼2012-04-27 20:05:03

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userhung

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★
jia1012428(金币+3): 谢谢参与

做一下看看不就知道了，祝福好运~~~~~~~~~~

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4楼2012-04-27 20:08:29

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xhjggl

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可以使用一步法酵母活性蛋白提取试剂盒 BSP026

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5楼2012-04-27 20:22:23

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喜马拉雅山

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没做过，顶一下

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6楼2012-04-28 00:22:53

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Scifinder2

银虫 (著名写手)

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Good luck to you.

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7楼2012-04-28 01:11:37

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zx6291

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应该没有问题，不加的话，可以超声破碎

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8楼2012-04-28 08:55:01

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ben1147

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EDTA不行，EGTA呢？
PMSF不行的话最好拿别的蛋白酶抑制剂代替吧

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9楼2012-04-28 09:39:21

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boying0928

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可以不加抑制剂，但是超声不行，酵母有细胞壁，可以用物理破碎的方法。

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10楼2012-04-28 22:21:24

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jia1012428

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引用回帖:

10楼: Originally posted by boying0928 at 2012-04-28 22:21:24:
可以不加抑制剂，但是超声不行，酵母有细胞壁，可以用物理破碎的方法。

哥们，我用酸洗玻璃珠破壁了，能破开，但是效果不好。请问你有什么好方法么？

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11楼2012-04-30 15:43:04

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chengjg

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超声功率600W、冰浴条件是可以的。间歇时间长一点没问题

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12楼2012-05-01 10:51:00

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漫游寄畅园

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换成别的酶抑制剂

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13楼2013-12-16 17:08:17

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