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jia1012428

铜虫 (小有名气)


[交流] 关于毕赤酵母胞内表达破壁的问题

我看了p.p的操作手册,配方是50 mM sodium phosphate, pH 7.4、1 mM PMSF、1 mM EDTA、5% glycerol。我的酶对PMSF和EDTA都敏感,可不可以不加,对酶有影响么?
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jia1012428

铜虫 (小有名气)


自己顶一下吧。
2楼2012-04-27 19:19:21
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jia1012428(金币+3): 谢谢参与
这个不明白
3楼2012-04-27 20:05:03
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userhung

禁虫 (文学泰斗)



jia1012428(金币+3): 谢谢参与
做一下看看不就知道了,祝福好运~~~~~~~~~~
4楼2012-04-27 20:08:29
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xhjggl

木虫 (正式写手)



jia1012428(金币+3): 谢谢参与
可以使用一步法酵母活性蛋白提取试剂盒   BSP026
5楼2012-04-27 20:22:23
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喜马拉雅山

铁虫 (初入文坛)



jia1012428(金币+3): 谢谢参与
没做过,顶一下
6楼2012-04-28 00:22:53
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Scifinder2

银虫 (著名写手)



jia1012428(金币+3): 谢谢参与
Good luck to you.
7楼2012-04-28 01:11:37
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zx6291

铜虫 (小有名气)



jia1012428(金币+3): 谢谢参与
应该没有问题,不加的话,可以超声破碎
8楼2012-04-28 08:55:01
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ben1147

木虫 (正式写手)



jia1012428(金币+3): 谢谢参与
EDTA不行,EGTA呢?
PMSF不行的话最好拿别的蛋白酶抑制剂代替吧
9楼2012-04-28 09:39:21
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boying0928

至尊木虫 (著名写手)



jia1012428(金币+3): 谢谢参与
可以不加抑制剂,但是超声不行,酵母有细胞壁,可以用物理破碎的方法。
10楼2012-04-28 22:21:24
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jia1012428

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
10楼: Originally posted by boying0928 at 2012-04-28 22:21:24:
可以不加抑制剂,但是超声不行,酵母有细胞壁,可以用物理破碎的方法。

哥们,我用酸洗玻璃珠破壁了,能破开,但是效果不好。请问你有什么好方法么?
11楼2012-04-30 15:43:04
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chengjg

木虫 (正式写手)



jia1012428(金币+3): 谢谢参与
超声功率600W、冰浴条件是可以的。间歇时间长一点没问题
12楼2012-05-01 10:51:00
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漫游寄畅园

木虫 (小有名气)



jia1012428(金币+3): 谢谢参与

换成别的酶抑制剂
13楼2013-12-16 17:08:17
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