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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 用扩增cDNA的引物扩增基因组DNA
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摩羯的心

铁虫 (小有名气)

[求助] 用扩增cDNA的引物扩增基因组DNA 已有7人参与

各位亲们，我之前用来扩增cDNA的引物用来扩增基因组DNA，刚开始的时候能得到一条目的条带，但之后几次，同样的条件下，不同的DNA样品，有的会出现一条目的条带，但有的除了目的条带外还会出现好多条条带，其中提取基因组DNA时没有加入RNA酶，将测得序列比对后，以cDNA为模板和以DNA为模板的序列比对结果相似性为99%，但现在我不知道是为什么会有的出现那么多条带，PCR条件都是一样的。各位大神帮帮忙吧~不胜感激
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1楼 2013-12-10 21:10:32
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竹子小小

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-11 19:33:05
你几次的扩增条件是一样的吗？第二次的模板或者引物浓度都一样吗。只要没有内含子，扩出来的都一样。基因组东西多，有杂带也正常
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5楼2013-12-11 16:03:00
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竹子小小

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 摩羯的心 at 2013-12-11 16:19:48
除了模板浓度不一样，其他的条件都一样，请问基因组PCR中模板的量一般是多少，我一般都是加入2ul，模板浓度一般为多少啊...

不知道你的是什么东西，我的是水稻的，每次10ul加0.5,不知道是多少浓度。
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12楼2013-12-12 10:10:54
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