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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 低温诱导蛋白表达时用多少度合适？
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574759350

铁虫 (小有名气)

[求助] 低温诱导蛋白表达时用多少度合适？ 已有1人参与

在做低温诱导蛋白表达时，大家一般用什么温度做诱导，诱导多长时间，所用IPTG浓度是多少？
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1楼 2013-12-04 09:55:45
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574759350

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by clcl88 at 2013-12-04 12:52:33
更正一下是28℃过夜，IPTG0.5mM，我们一般用载体为pet28b，然后BL21表达

我也是pet28b载体转化的BL21，刚开始用37℃，基本都是包涵体形式，你这样做的效果怎么样？
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6楼2013-12-04 13:37:12
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宋晨萌1992

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-04 12:55:05
574759350: 金币+2, ★有帮助 2013-12-04 13:37:49
IPTG 浓度时0.1mM 诱导时间一般24个小时 如果是冷休克载体的话是15度诱导
不同的宿主和载体可能略有差异 可以以上面数据为基点，做个一定范围的探索
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2楼2013-12-04 10:29:49
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zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-04 12:55:12
574759350: 金币+1, ★有帮助 2013-12-04 13:38:01
我以前做的大肠，16度诱导10-15小时，IPTG浓度0.1-1mM都可以。只作为参考，不同的宿主和载体可能会有差别
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3楼2013-12-04 12:21:18
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clcl88

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-04 12:55:20
574759350: 金币+2, ★有帮助 2013-12-04 13:37:28
我们一般是16℃，过夜。IPTG0.5mM
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4楼2013-12-04 12:44:41
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