应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助哪位用琼脂糖电泳跑过蛋白的高手
51/1返回列表
查看: 3549  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

魔音涟漪

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助哪位用琼脂糖电泳跑过蛋白的高手 已有2人参与

求助大神，我的样品分子量最大有1000KDa,所以想用琼脂糖凝胶电泳跑一下，不需要特别精确的，我只是要看一下他们变化的趋势，但是第一次尝试用的1%的琼脂糖凝胶，没有加EB，样品未处理，跑出来我是用考马斯亮蓝染色然后脱色的，但是什么也没有，是不是因为没有处理样品，还是电泳缓冲液需要换一下？求大神指导
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-12-03 10:18:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

魔音涟漪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Davidzjy at 2013-12-03 11:38:35
有没有用表面活性剂？不用活性剂肯定跑不出来
1 蛋白质的二级结构没有被破坏 三维形态会影响摩擦力
2 不同蛋白的pI不同 在胶中前进的速率不一样

PAGE中加入的表面活性剂（SDS等）会以固定比例结合在肽键上  ...

那我试一试在样品中加入SDS吗?那电泳缓冲液也需要换成PAGE的吗
赞一下 回复此楼
3楼2013-12-03 13:14:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

Davidzjy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+3, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-03 12:31:20
有没有用表面活性剂？不用活性剂肯定跑不出来
1 蛋白质的二级结构没有被破坏 三维形态会影响摩擦力
2 不同蛋白的pI不同 在胶中前进的速率不一样

PAGE中加入的表面活性剂（SDS等）会以固定比例结合在肽键上 破坏原有的扭曲 使肽链成为一条长链
并且 因为每个肽键结合固定数量的带电分子 因此 肽链的带电量和其长度基本成正比（肽链越长 肽键越多）
从而使得它们在胶中的行进速率成比例
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-12-03 11:38:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Davidzjy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我觉得还是安安心心的跑PAGE才是正道
实在不行就去找一些琼脂糖跑蛋白的protocol
赞一下 回复此楼
4楼2013-12-03 13:22:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

魔音涟漪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Davidzjy at 2013-12-03 13:22:22
我觉得还是安安心心的跑PAGE才是正道
实在不行就去找一些琼脂糖跑蛋白的protocol

我的样品之前跑过page了，但是他是1000KDa，PAGE不是最大也就二三百吗？
赞一下 回复此楼
5楼2013-12-03 14:14:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 307求调剂 +9 冷笙123 2026-03-17 9/450 2026-03-19 22:44 by 学员8dgXkO
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +14 陌の森林 2026-03-18 14/700 2026-03-19 22:38 by 学员8dgXkO
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 266求调剂 +5 阳阳哇塞 2026-03-14 10/500 2026-03-19 15:08 by 阳阳哇塞
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 332求调剂 +3 ydfyh 2026-03-17 3/150 2026-03-19 10:14 by 功夫疯狂
[考研] 材料专硕英一数二306 +5 z1z2z3879 2026-03-18 5/250 2026-03-19 07:43 by BruceLiu320
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +4 守候夕阳CF 2026-03-18 4/200 2026-03-18 22:16 by li123456789.
[考研] 354求调剂 +4 Tyoumou 2026-03-18 7/350 2026-03-18 21:45 by Tyoumou
[考研] 295求调剂 +3 一志愿京区211 2026-03-18 5/250 2026-03-18 17:03 by zhaoqian0518
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +8 Ncdx123456 2026-03-13 9/450 2026-03-18 14:40 by haxia
[考研] 0854，计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 0703化学336分求调剂 +6 zbzihdhd 2026-03-15 7/350 2026-03-18 09:53 by zhukairuo
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿，福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭