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bnusysj

新虫 (小有名气)

[求助] 氨基量子点跑琼脂糖凝胶电泳

最近小弟用合成的巯基乙胺修饰的CdTe量子点跑琼脂糖凝胶电泳,TBE为电泳buffer,发现通电后,量子点无法进入胶中,都贴在胶孔的壁上,然后荧光就慢慢消失了;但是用巯基丙酸修饰的量子点能很好的进入胶中,所以我想问问如何才能避免量子点在电泳时聚沉;我思考了以下几种原因:
1、TBE中的EDTA导致量子点的聚沉;
2、TBE的pH为8.3,在这个pH值时,氨基修饰的量子点非常不稳定,容易聚沉;
3、琼脂糖胶的浓度太大(我用的是1%的琼脂糖);
针对以上几点原因,有何良策解决;另外,如有虫友有类似的经历,希望指点小弟解决我的问题,小弟在此跪谢了。
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conanzzz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
bnusysj: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-09-25 08:48:02
1.用硼酸缓冲液跑
2.碱性条件比酸性条件更利于量子点稳定
3.取决于你QD的大小,可以往低浓度试,但应该不是主要原因
另,有些QD就是不能这么表征,也说不清楚原因,也可以考虑下是不是多余配体没有洗干净
2楼2013-09-24 22:20:32
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bnusysj

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by conanzzz at 2013-09-24 22:20:32
1.用硼酸缓冲液跑
2.碱性条件比酸性条件更利于量子点稳定
3.取决于你QD的大小,可以往低浓度试,但应该不是主要原因
另,有些QD就是不能这么表征,也说不清楚原因,也可以考虑下是不是多余配体没有洗干净

你指的硼酸缓冲是指用硼酸和NaOH配制的缓冲吗?我也有看到配制TBE缓冲的时候不加EDTA,是不是这样也可以啊?
3楼2013-09-25 08:51:33
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bnusysj

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by conanzzz at 2013-09-24 22:20:32
1.用硼酸缓冲液跑
2.碱性条件比酸性条件更利于量子点稳定
3.取决于你QD的大小,可以往低浓度试,但应该不是主要原因
另,有些QD就是不能这么表征,也说不清楚原因,也可以考虑下是不是多余配体没有洗干净

还有,氨基在碱性条件下质子化程度不如酸性条件下强,那为什们氨基量子点会在碱性条件下稳定呢,(买到的氨基量子点一般都是用硼酸缓冲保存(pH=8.4))为什么呢?
4楼2013-09-25 08:58:28
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conanzzz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
bnusysj: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢啦,有问题再交流啊。 2013-09-25 16:24:35
引用回帖:
4楼: Originally posted by bnusysj at 2013-09-25 08:58:28
还有,氨基在碱性条件下质子化程度不如酸性条件下强,那为什们氨基量子点会在碱性条件下稳定呢,(买到的氨基量子点一般都是用硼酸缓冲保存(pH=8.4))为什么呢?...

我也不懂合成原理,猜测是不是跟配体稳定性有关,你再请教请教别人吧~~
5楼2013-09-25 10:04:44
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