应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 学术讨论 » 【请教】量子点与抗体连接后，用SDS电泳确定连接时，量子点无法进入分离胶。。。
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
211/1返回列表
查看: 3042  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

校长大人

金虫 (小有名气)

[交流] 【请教】量子点与抗体连接后，用SDS电泳确定连接时，量子点无法进入分离胶。。。

请教大家谁做过这方面的实验，能够给些建议或意见的？
我试过的有：调节浓缩胶和分离胶的ph分别为6.8和8.8，加大电压150，延长电泳时间。。。最后紫外下观察还是不能进入
郁闷。。。求助~多谢了。。。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

Fluorescent Nanomaterials 探针 高分子 SEM

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2010-12-29 15:23:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ashui001

木虫 (著名写手)
★
nuaajsh(金币+1):鼓励交流 2011-01-01 21:24:05
校长大人(金币+4):谢谢！ 2011-01-04 09:10:12
量子点跑SDS-PAGE不太好跑，我跑的虽然能进去，但拖尾很严重
用琼脂糖胶跑的比较好，文献中大部分也是跑琼脂糖胶的
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-12-30 10:10:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jeanne530

新虫 (初入文坛)
★
nuaajsh(金币+1):鼓励交流 2011-01-01 21:24:12
校长大人(金币+6):嗯 我试试看 太感谢了 2011-01-04 09:11:09
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照  如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-12-31 13:36:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jeanne530 at 2010-12-31 13:36:36:
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照  如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了

想请问一下，这种琼脂糖凝胶电泳，是跑平板电泳还是灌垂直胶电泳呢？水平或垂直有没有影响呢？使用的loading buffer 是sds-page电泳的buffer么？
多谢了~
赞一下 回复此楼
4楼2011-01-04 09:58:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jeanne530 at 2010-12-31 13:36:36:
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照  如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了

想请问一下，这种琼脂糖凝胶电泳，是跑平板电泳还是灌垂直胶电泳呢？水平或垂直有没有影响呢？使用的loading buffer 是sds-page电泳的buffer么？
赞一下 回复此楼
5楼2011-01-04 09:59:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenyiping

铁虫 (小有名气)
建议跑个毛细管电泳
赞一下 回复此楼
6楼2011-03-01 20:57:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

custardchen

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by ashui001 at 2010-12-30 04:10:24:
量子点跑SDS-PAGE不太好跑，我跑的虽然能进去，但拖尾很严重
用琼脂糖胶跑的比较好，文献中大部分也是跑琼脂糖胶的

请问您跑琼脂糖胶的时候 用的Loading buffer  是什么啊
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-03-02 09:32:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ashui001

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by custardchen at 2011-03-02 09:32:38:
请问您跑琼脂糖胶的时候 用的Loading buffer  是什么啊

用25%的甘油水溶液就好了
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-03-02 10:15:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

custardchen

金虫 (小有名气)
O(∩_∩)O~  谢谢啦
赞一下 回复此楼
9楼2011-03-02 10:18:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tntgascan

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by jeanne530 at 2010-12-31 13:36:36:
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照  如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了

请问团聚的话是什么现象？要怎么解决呢？
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2011-03-05 10:16:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyufei3087

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by ashui001 at 2010-12-30 10:10:24:
量子点跑SDS-PAGE不太好跑，我跑的虽然能进去，但拖尾很严重
用琼脂糖胶跑的比较好，文献中大部分也是跑琼脂糖胶的

我想问一下，他跑的那个里还有蛋白质，如果琼脂糖跑完了，怎么回收样品呢？
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2011-12-05 12:21:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crush_bc

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
找本本科分子生物学实验教材，很简单的~~蛋白质一般使用垂直SDS凝胶电泳，DNA采用琼脂糖呢，前者比后者的分离精度高（交联度大），对结合量子点的抗体采用垂直板SDS是可以的~~找本分子生物学实验教材看看
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2011-12-30 14:17:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ashui001 at 2010-12-30 10:10:24:
量子点跑SDS-PAGE不太好跑，我跑的虽然能进去，但拖尾很严重
用琼脂糖胶跑的比较好，文献中大部分也是跑琼脂糖胶的

您好，我试了一下琼脂糖胶，拖尾很严重，没有形成条带的感觉，想向您讨教一下可能的原因，另外，团聚的问题在连接反应时是如何避免的？
赞一下 回复此楼
13楼2012-03-01 16:39:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jeanne530 at 2010-12-31 13:36:36:
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照  如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了

您好，我试了一下琼脂糖胶，拖尾很严重，没有形成条带的感觉，想向您讨教一下可能的原因，另外，团聚的问题在连接反应时是如何避免的？
赞一下 回复此楼
14楼2012-03-01 16:40:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by chenyiping at 2011-03-01 20:57:04:
建议跑个毛细管电泳

之前也想过，但是老板坚持说SDS电泳比较直观。。。
赞一下 回复此楼
15楼2012-03-01 16:42:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ashui001

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
14楼: Originally posted by 校长大人 at 2012-03-01 16:40:48:
您好，我试了一下琼脂糖胶，拖尾很严重，没有形成条带的感觉，想向您讨教一下可能的原因，另外，团聚的问题在连接反应时是如何避免的？

请问你的量子点是什么材料，尤其是表面性质，是自己做的还是买的？
赞一下 回复此楼
16楼2012-03-02 22:17:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by ashui001 at 2012-03-02 22:17:06:
请问你的量子点是什么材料，尤其是表面性质，是自己做的还是买的？

是买的 羧基化修饰的CdSe量子点 水溶性还是挺好的。和蛋白的连接反应是我自己做的 但是电泳一直不行。。。 试过很多种办法都不行  所以想请问一下做过的给些建议。
赞一下 回复此楼
17楼2012-03-06 16:01:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenyiping

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
应该配一个胶的孔径大的作为分离胶，这样量子点容易进去
赞一下 回复此楼
18楼2012-03-06 16:20:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ashui001

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
17楼: Originally posted by 校长大人 at 2012-03-06 16:01:38:
是买的 羧基化修饰的CdSe量子点 水溶性还是挺好的。和蛋白的连接反应是我自己做的 但是电泳一直不行。。。 试过很多种办法都不行  所以想请问一下做过的给些建议。

如果你用琼脂糖凝胶只跑量子点就有明显的拖尾，应该是量子点本省的质量问题，虽然水溶性比较好，不代表量子点的粒径分布均匀，或者没有团聚，建议你换一家量子点，或者用更低浓度的琼脂糖凝胶再跑下试试

偶联蛋白后有拖尾比较正常，要根据你偶联的蛋白分子量决定拖尾，以及你的偶联条件和电泳条件
赞一下 回复此楼
19楼2012-03-09 12:18:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whlnncrystal

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
1956221楼: Originally posted by 校长大人 at 2012-03-01 16:40:48
您好，我试了一下琼脂糖胶，拖尾很严重，没有形成条带的感觉，想向您讨教一下可能的原因，另外，团聚的问题在连接反应时是如何避免的？...

我刚做完偶联，也同样跑得拖尾很严重，请问你后面这个问题解决了吗？
赞一下(1人) 回复此楼
20楼2012-06-18 11:32:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

conanzzz

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
量子点使用前先10000转离心除去团聚,一般20纳米左右的量子点应该就不适合用PAGE胶来跑了,还是琼脂糖胶吧浓度也不要太高,0.5%-1%之间.另外如果QDs荧光挺强的上样量也不要太多~
赞一下 回复此楼
21楼2012-08-10 17:56:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 校长大人 的主题更新
211/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 285求调剂 +8 哦呦呼o 2026-04-04 8/400 2026-04-04 23:16 by lqwchd
[考研] 085600调剂 +8 东照照照 2026-04-04 8/400 2026-04-04 22:26 by oooqiao
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-03 4/200 2026-04-04 22:17 by hemengdong
[考研] 085404总分289，求调剂 +4 Acesczlo 2026-03-29 4/200 2026-04-04 21:43 by hemengdong
[考研] 一志愿安徽某211 0703化学总分339求调剂 +6 晚风不晚 2026-04-04 6/300 2026-04-04 20:11 by dongzh2009
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-03-31 5/250 2026-04-04 19:45 by 1753564080
[考研] 333求调剂 +9 阿科逸 2026-03-31 9/450 2026-04-04 18:25 by macy2011
[考研] 306求调剂 +3 hyb上名工 2026-04-02 3/150 2026-04-04 18:12 by 热情沙漠
[考研] 363求调剂 +7 zh096 2026-04-04 7/350 2026-04-04 17:13 by dongzh2009
[考研] 考研调剂 +3 15615482637 2026-04-03 3/150 2026-04-03 22:50 by ms629
[考研] 考研求调剂 +3 木心想继续深造 2026-04-03 3/150 2026-04-03 21:56 by 啵啵啵0119
[考研] 085600 295分求调剂 +19 W55j 2026-03-30 23/1150 2026-04-03 09:53 by 千千运气
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +3 cs0106 2026-04-02 5/250 2026-04-02 11:37 by olim
[考研] 求调剂，一志愿 南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕，总分289分 +11 @taotao 2026-03-29 11/550 2026-04-02 10:04 by realme321
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-03-31 11/550 2026-04-01 22:25 by zhouyuwinner
[考研] 江苏科技大学招材料研究生 +4 Su032713. 2026-04-01 5/250 2026-04-01 22:03 by cccchenso
[考研] 0855机械初试280求调剂 +3 kazenotori 2026-03-31 3/150 2026-04-01 10:08 by JourneyLucky
[考研] 【调剂】一志愿厦大生物与医药调剂 +3 Echo虾米 2026-03-31 3/150 2026-04-01 08:40 by JourneyLucky
[考研] 材料科学与工程求调剂 +13 深V宿舍吧 2026-03-29 13/650 2026-03-31 19:50 by Dyhoer
[考博] 材料专业申博 +5 杜雨婷dyt 2026-03-29 5/250 2026-03-31 11:19 by oooqiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭