应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 学术讨论 » 【请教】量子点与抗体连接后，用SDS电泳确定连接时，量子点无法进入分离胶。。。
211/1返回列表
查看: 2958  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

校长大人

金虫 (小有名气)

[交流] 【请教】量子点与抗体连接后，用SDS电泳确定连接时，量子点无法进入分离胶。。。

请教大家谁做过这方面的实验，能够给些建议或意见的？
我试过的有：调节浓缩胶和分离胶的ph分别为6.8和8.8，加大电压150，延长电泳时间。。。最后紫外下观察还是不能进入
郁闷。。。求助~多谢了。。。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

Fluorescent Nanomaterials 探针 高分子 SEM

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2010-12-29 15:23:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ashui001

木虫 (著名写手)
★
nuaajsh(金币+1):鼓励交流 2011-01-01 21:24:05
校长大人(金币+4):谢谢！ 2011-01-04 09:10:12
量子点跑SDS-PAGE不太好跑，我跑的虽然能进去，但拖尾很严重
用琼脂糖胶跑的比较好，文献中大部分也是跑琼脂糖胶的
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-12-30 10:10:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jeanne530

新虫 (初入文坛)
★
nuaajsh(金币+1):鼓励交流 2011-01-01 21:24:12
校长大人(金币+6):嗯 我试试看 太感谢了 2011-01-04 09:11:09
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照  如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-12-31 13:36:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jeanne530 at 2010-12-31 13:36:36:
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照  如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了

想请问一下，这种琼脂糖凝胶电泳，是跑平板电泳还是灌垂直胶电泳呢？水平或垂直有没有影响呢？使用的loading buffer 是sds-page电泳的buffer么？
多谢了~
赞一下 回复此楼
4楼2011-01-04 09:58:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jeanne530 at 2010-12-31 13:36:36:
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照  如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了

想请问一下，这种琼脂糖凝胶电泳，是跑平板电泳还是灌垂直胶电泳呢？水平或垂直有没有影响呢？使用的loading buffer 是sds-page电泳的buffer么？
赞一下 回复此楼
5楼2011-01-04 09:59:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenyiping

铁虫 (小有名气)
建议跑个毛细管电泳
赞一下 回复此楼
6楼2011-03-01 20:57:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

custardchen

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by ashui001 at 2010-12-30 04:10:24:
量子点跑SDS-PAGE不太好跑，我跑的虽然能进去，但拖尾很严重
用琼脂糖胶跑的比较好，文献中大部分也是跑琼脂糖胶的

请问您跑琼脂糖胶的时候 用的Loading buffer  是什么啊
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-03-02 09:32:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ashui001

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by custardchen at 2011-03-02 09:32:38:
请问您跑琼脂糖胶的时候 用的Loading buffer  是什么啊

用25%的甘油水溶液就好了
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-03-02 10:15:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

custardchen

金虫 (小有名气)
O(∩_∩)O~  谢谢啦
赞一下 回复此楼
9楼2011-03-02 10:18:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tntgascan

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by jeanne530 at 2010-12-31 13:36:36:
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照  如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了

请问团聚的话是什么现象？要怎么解决呢？
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2011-03-05 10:16:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyufei3087

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by ashui001 at 2010-12-30 10:10:24:
量子点跑SDS-PAGE不太好跑，我跑的虽然能进去，但拖尾很严重
用琼脂糖胶跑的比较好，文献中大部分也是跑琼脂糖胶的

我想问一下，他跑的那个里还有蛋白质，如果琼脂糖跑完了，怎么回收样品呢？
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2011-12-05 12:21:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crush_bc

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
找本本科分子生物学实验教材，很简单的~~蛋白质一般使用垂直SDS凝胶电泳，DNA采用琼脂糖呢，前者比后者的分离精度高（交联度大），对结合量子点的抗体采用垂直板SDS是可以的~~找本分子生物学实验教材看看
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2011-12-30 14:17:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ashui001 at 2010-12-30 10:10:24:
量子点跑SDS-PAGE不太好跑，我跑的虽然能进去，但拖尾很严重
用琼脂糖胶跑的比较好，文献中大部分也是跑琼脂糖胶的

您好，我试了一下琼脂糖胶，拖尾很严重，没有形成条带的感觉，想向您讨教一下可能的原因，另外，团聚的问题在连接反应时是如何避免的？
赞一下 回复此楼
13楼2012-03-01 16:39:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jeanne530 at 2010-12-31 13:36:36:
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照  如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了

您好，我试了一下琼脂糖胶，拖尾很严重，没有形成条带的感觉，想向您讨教一下可能的原因，另外，团聚的问题在连接反应时是如何避免的？
赞一下 回复此楼
14楼2012-03-01 16:40:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by chenyiping at 2011-03-01 20:57:04:
建议跑个毛细管电泳

之前也想过，但是老板坚持说SDS电泳比较直观。。。
赞一下 回复此楼
15楼2012-03-01 16:42:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ashui001

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
14楼: Originally posted by 校长大人 at 2012-03-01 16:40:48:
您好，我试了一下琼脂糖胶，拖尾很严重，没有形成条带的感觉，想向您讨教一下可能的原因，另外，团聚的问题在连接反应时是如何避免的？

请问你的量子点是什么材料，尤其是表面性质，是自己做的还是买的？
赞一下 回复此楼
16楼2012-03-02 22:17:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by ashui001 at 2012-03-02 22:17:06:
请问你的量子点是什么材料，尤其是表面性质，是自己做的还是买的？

是买的 羧基化修饰的CdSe量子点 水溶性还是挺好的。和蛋白的连接反应是我自己做的 但是电泳一直不行。。。 试过很多种办法都不行  所以想请问一下做过的给些建议。
赞一下 回复此楼
17楼2012-03-06 16:01:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenyiping

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
应该配一个胶的孔径大的作为分离胶，这样量子点容易进去
赞一下 回复此楼
18楼2012-03-06 16:20:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ashui001

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
17楼: Originally posted by 校长大人 at 2012-03-06 16:01:38:
是买的 羧基化修饰的CdSe量子点 水溶性还是挺好的。和蛋白的连接反应是我自己做的 但是电泳一直不行。。。 试过很多种办法都不行  所以想请问一下做过的给些建议。

如果你用琼脂糖凝胶只跑量子点就有明显的拖尾，应该是量子点本省的质量问题，虽然水溶性比较好，不代表量子点的粒径分布均匀，或者没有团聚，建议你换一家量子点，或者用更低浓度的琼脂糖凝胶再跑下试试

偶联蛋白后有拖尾比较正常，要根据你偶联的蛋白分子量决定拖尾，以及你的偶联条件和电泳条件
赞一下 回复此楼
19楼2012-03-09 12:18:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whlnncrystal

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
1956221楼: Originally posted by 校长大人 at 2012-03-01 16:40:48
您好，我试了一下琼脂糖胶，拖尾很严重，没有形成条带的感觉，想向您讨教一下可能的原因，另外，团聚的问题在连接反应时是如何避免的？...

我刚做完偶联，也同样跑得拖尾很严重，请问你后面这个问题解决了吗？
赞一下(1人) 回复此楼
20楼2012-06-18 11:32:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

conanzzz

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
量子点使用前先10000转离心除去团聚,一般20纳米左右的量子点应该就不适合用PAGE胶来跑了,还是琼脂糖胶吧浓度也不要太高,0.5%-1%之间.另外如果QDs荧光挺强的上样量也不要太多~
赞一下 回复此楼
21楼2012-08-10 17:56:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 校长大人 的主题更新
211/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 326求调剂 +3 上岸的小葡 2026-03-15 4/200 2026-03-15 18:50 by 无际的草原
[基金申请] 国自科面上基金字体 +4 iwuli 2026-03-12 5/250 2026-03-15 17:07 by 风云无泪
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油！? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-15 3/150 2026-03-15 09:12 by JourneyLucky
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 求调剂，药学 +3 归零lbm 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:21 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 清风问长安 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:15 by JourneyLucky
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工296分求调剂 +16 稻妻小编 2026-03-09 18/900 2026-03-14 02:00 by JourneyLucky
[考研] 考研材料与化工，求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:14 by JourneyLucky
[考研] 招收0805（材料）调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 求调剂，一志愿江南大学环境工程085701 +3 Djdjj12 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:31 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工求调剂一志愿 985 总分 295 +8 dream…… 2026-03-12 8/400 2026-03-13 22:17 by 星空星月
[考研] 材料工程调剂 +4 咪咪空空 2026-03-11 4/200 2026-03-13 19:57 by JourneyLucky
[硕博家园] 深圳大学硕士招生（2026秋，传感器方向，仅录取第一志愿） +4 xujiaoszu 2026-03-11 7/350 2026-03-13 17:28 by xujiaoszu
[考研] 302求调剂 +6 负心者当诛 2026-03-11 6/300 2026-03-13 16:11 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
[考研] 家人们 调剂不迷路 看这里 +8 likeihood 2026-03-09 13/650 2026-03-10 08:09 by likeihood
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭