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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 学术讨论 » 【请教】量子点与抗体连接后，用SDS电泳确定连接时，量子点无法进入分离胶。。。
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校长大人

金虫 (小有名气)

[交流] 【请教】量子点与抗体连接后，用SDS电泳确定连接时，量子点无法进入分离胶。。。

请教大家谁做过这方面的实验，能够给些建议或意见的？
我试过的有：调节浓缩胶和分离胶的ph分别为6.8和8.8，加大电压150，延长电泳时间。。。最后紫外下观察还是不能进入
郁闷。。。求助~多谢了。。。
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1楼 2010-12-29 15:23:27
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校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jeanne530 at 2010-12-31 13:36:36:
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照  如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了

想请问一下，这种琼脂糖凝胶电泳，是跑平板电泳还是灌垂直胶电泳呢？水平或垂直有没有影响呢？使用的loading buffer 是sds-page电泳的buffer么？
多谢了~
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4楼2011-01-04 09:58:55
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校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jeanne530 at 2010-12-31 13:36:36:
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照  如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了

想请问一下，这种琼脂糖凝胶电泳，是跑平板电泳还是灌垂直胶电泳呢？水平或垂直有没有影响呢？使用的loading buffer 是sds-page电泳的buffer么？
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5楼2011-01-04 09:59:10
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校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ashui001 at 2010-12-30 10:10:24:
量子点跑SDS-PAGE不太好跑，我跑的虽然能进去，但拖尾很严重
用琼脂糖胶跑的比较好，文献中大部分也是跑琼脂糖胶的

您好，我试了一下琼脂糖胶，拖尾很严重，没有形成条带的感觉，想向您讨教一下可能的原因，另外，团聚的问题在连接反应时是如何避免的？
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13楼2012-03-01 16:39:59
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校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jeanne530 at 2010-12-31 13:36:36:
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照  如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了

您好，我试了一下琼脂糖胶，拖尾很严重，没有形成条带的感觉，想向您讨教一下可能的原因，另外，团聚的问题在连接反应时是如何避免的？
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14楼2012-03-01 16:40:48
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校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by chenyiping at 2011-03-01 20:57:04:
建议跑个毛细管电泳

之前也想过，但是老板坚持说SDS电泳比较直观。。。
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15楼2012-03-01 16:42:21
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校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by ashui001 at 2012-03-02 22:17:06:
请问你的量子点是什么材料，尤其是表面性质，是自己做的还是买的？

是买的 羧基化修饰的CdSe量子点 水溶性还是挺好的。和蛋白的连接反应是我自己做的 但是电泳一直不行。。。 试过很多种办法都不行  所以想请问一下做过的给些建议。
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17楼2012-03-06 16:01:38
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