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【请教】量子点与抗体连接后,用SDS电泳确定连接时,量子点无法进入分离胶。。。
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校长大人
金虫
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(幼儿园)
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虫号: 947946
[交流]
【请教】量子点与抗体连接后,用SDS电泳确定连接时,量子点无法进入分离胶。。。
请教大家谁做过这方面的实验,能够给些建议或意见的?
我试过的有:调节浓缩胶和分离胶的ph分别为6.8和8.8,加大电压150,延长电泳时间。。。最后紫外下观察还是不能进入
郁闷。。。求助~多谢了。。。
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2010-12-29 15:23:27
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crush_bc
银虫
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帖子: 736
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虫号: 719015
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖
找本本科分子生物学实验教材,很简单的~~蛋白质一般使用垂直SDS凝胶电泳,DNA采用琼脂糖呢,前者比后者的分离精度高(交联度大),对结合量子点的抗体采用垂直板SDS是可以的~~找本分子生物学实验教材看看
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12楼
2011-12-30 14:17:43
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ashui001
木虫
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★
nuaajsh(金币+1):鼓励交流 2011-01-01 21:24:05
校长大人(金币+4):谢谢! 2011-01-04 09:10:12
量子点跑SDS-PAGE不太好跑,我跑的虽然能进去,但拖尾很严重
用琼脂糖胶跑的比较好,文献中大部分也是跑琼脂糖胶的
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2楼
2010-12-30 10:10:24
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jeanne530
新虫
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★
nuaajsh(金币+1):鼓励交流 2011-01-01 21:24:12
校长大人(金币+6):嗯 我试试看 太感谢了 2011-01-04 09:11:09
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照 如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了
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3楼
2010-12-31 13:36:36
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校长大人
金虫
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引用回帖:
Originally posted by
jeanne530
at 2010-12-31 13:36:36:
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照 如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了
想请问一下,这种琼脂糖凝胶电泳,是跑平板电泳还是灌垂直胶电泳呢?水平或垂直有没有影响呢?使用的loading buffer 是sds-page电泳的buffer么?
多谢了~
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4楼
2011-01-04 09:58:55
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