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校长大人

金虫 (小有名气)

[交流] 【请教】量子点与抗体连接后，用SDS电泳确定连接时，量子点无法进入分离胶。。。

请教大家谁做过这方面的实验，能够给些建议或意见的？
我试过的有：调节浓缩胶和分离胶的ph分别为6.8和8.8，加大电压150，延长电泳时间。。。最后紫外下观察还是不能进入
郁闷。。。求助~多谢了。。。
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1楼 2010-12-29 15:23:27
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jeanne530

新虫 (初入文坛)
★
nuaajsh(金币+1):鼓励交流 2011-01-01 21:24:12
校长大人(金币+6):嗯 我试试看 太感谢了 2011-01-04 09:11:09
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照  如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了
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3楼2010-12-31 13:36:36
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ashui001

木虫 (著名写手)
★
nuaajsh(金币+1):鼓励交流 2011-01-01 21:24:05
校长大人(金币+4):谢谢！ 2011-01-04 09:10:12
量子点跑SDS-PAGE不太好跑，我跑的虽然能进去，但拖尾很严重
用琼脂糖胶跑的比较好，文献中大部分也是跑琼脂糖胶的
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2楼2010-12-30 10:10:24
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校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jeanne530 at 2010-12-31 13:36:36:
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照  如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了

想请问一下，这种琼脂糖凝胶电泳，是跑平板电泳还是灌垂直胶电泳呢？水平或垂直有没有影响呢？使用的loading buffer 是sds-page电泳的buffer么？
多谢了~
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4楼2011-01-04 09:58:55
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校长大人

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jeanne530 at 2010-12-31 13:36:36:
跑琼脂糖胶比较好吧 因为SDS胶中孔径比琼脂糖的要小 而且如果连接产物中团聚现象的话就更跑不出来了 建议你用1%的琼脂糖胶跑下试试 以光QD为参照  如果还跑不出来的话就说明团聚现象很严重了

想请问一下，这种琼脂糖凝胶电泳，是跑平板电泳还是灌垂直胶电泳呢？水平或垂直有没有影响呢？使用的loading buffer 是sds-page电泳的buffer么？
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5楼2011-01-04 09:59:10
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