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24K_纯虹

铁虫 (初入文坛)

[交流] 有关重叠PCR的问题,请各位讲解一下已有5人参与

大家好,我现在在做一个重叠PCR的实验,我要连接的三个片段X、Cm(氯霉素片段)、Y均750bp,我先通过正常的PCR技术获得X、Cm(氯霉素片段)、Y条带,然后尝试先重叠X、Cm,得到XC之后再连Y的时候怎么也连不上,请问为什么?我是新手,请指点一下有关重叠PCR当中需要注意的地方,谢谢!
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镖跟靶的每次分离,都是为了再一次重回把心,所以,等待。。。
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nannanz2012

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
最后一片断进行重叠引物的扩增没?XC怎么得到的,然后cxy就按原先的程序走呀,大同小异。祝好运
6楼2013-11-24 13:46:30
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sun_in_night

木虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-23 01:20:11
推荐看一下这篇文章Gene splicing and mutagenesis by PCR-driven overlap extension. Karin L Heckman & Larry R Pease,2007,nature protocols
2楼2013-11-22 23:16:25
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2013-11-23 01:21:00
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

没做过,不知道

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2013-11-23 04:12:12
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