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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 单头棉蚜RNA提取
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摩羯的心

铁虫 (小有名气)

[求助] 单头棉蚜RNA提取

谁做过单头棉蚜RNA啊  鉴于个体太小，请问用什么试剂盒呢  方法是怎么样的  大家帮帮忙  谢谢
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1楼 2013-11-19 10:55:29
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-11-21 08:53:06
用Trizol提取。
动物组织RNA提取
（1）        加入1.0ml Trizol混匀，研磨，室温放置5min；
（2）        加入200ul氯仿/1mlTrizol；
（3）        震动15s混匀，室温放置2-3min；
（4）        4℃,12,000g离心15min；
（5）        取上清，加入等体积异丙醇，混匀，室温(冰上)放置10min
（6）        4℃,12,000g离心10min
（7）        加入1.0ml 75%乙醇（现用现配），震荡
（8）        4℃,7,500g离心5min
（9）        沉淀室温晾干5-10 min
以上均使用RNase-free的水
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戒骄戒躁，坦荡做人，平常心做事，享受生活之美！！
2楼2013-11-19 20:44:08
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

用1ml的研磨器研磨，最后凉干酒精后，加几微升水溶解。建议先用多头提取，等手法成熟了，在用单头提取。
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戒骄戒躁，坦荡做人，平常心做事，享受生活之美！！
3楼2013-11-19 20:46:26
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摩羯的心

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 疯狂修行者 at 2013-11-19 20:46:26
用1ml的研磨器研磨，最后凉干酒精后，加几微升水溶解。建议先用多头提取，等手法成熟了，在用单头提取。

用研磨器行吗？棉蚜单头真心太小了  怕是一下子就没有了吧
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4楼2013-11-20 08:36:23
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jasco

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
多收集些混在一起，trizol提取就可以了
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5楼2013-11-20 10:17:37
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Eva2009

禁虫 (初入文坛)
★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-11-21 08:53:12
本帖内容被屏蔽
6楼2013-11-20 15:45:46
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 摩羯的心 at 2013-11-20 08:36:23
用研磨器行吗？棉蚜单头真心太小了  怕是一下子就没有了吧...

小的研磨器是可以的。或者你用液氮，就像6楼说的，用液氮。研磨棒不好弄，你可以把蓝枪头烧一下，在放到离心管里做成研磨棒。
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戒骄戒躁，坦荡做人，平常心做事，享受生活之美！！
7楼2013-11-20 23:20:11
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摩羯的心

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 疯狂修行者 at 2013-11-20 23:20:11
小的研磨器是可以的。或者你用液氮，就像6楼说的，用液氮。研磨棒不好弄，你可以把蓝枪头烧一下，在放到离心管里做成研磨棒。...

非常感谢
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8楼2013-11-21 10:45:14
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JuanziXu

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

单头可以提取到的，我们试验过！不过技术要很娴熟，操作很小心才行！不用液氮也可以的！
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9楼2013-11-22 16:24:37
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