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摩羯的心

铁虫 (小有名气)

[求助] 单头棉蚜RNA提取

谁做过单头棉蚜RNA啊  鉴于个体太小,请问用什么试剂盒呢  方法是怎么样的  大家帮帮忙  谢谢
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-11-21 08:53:06
用Trizol提取。
动物组织RNA提取
(1)        加入1.0ml Trizol混匀,研磨,室温放置5min;
(2)        加入200ul氯仿/1mlTrizol;
(3)        震动15s混匀,室温放置2-3min;
(4)        4℃,12,000g离心15min;
(5)        取上清,加入等体积异丙醇,混匀,室温(冰上)放置10min
(6)        4℃,12,000g离心10min
(7)        加入1.0ml 75%乙醇(现用现配),震荡
(8)        4℃,7,500g离心5min
(9)        沉淀室温晾干5-10 min
以上均使用RNase-free的水
戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
2楼2013-11-19 20:44:08
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

用1ml的研磨器研磨,最后凉干酒精后,加几微升水溶解。建议先用多头提取,等手法成熟了,在用单头提取。
戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
3楼2013-11-19 20:46:26
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摩羯的心

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 疯狂修行者 at 2013-11-19 20:46:26
用1ml的研磨器研磨,最后凉干酒精后,加几微升水溶解。建议先用多头提取,等手法成熟了,在用单头提取。

用研磨器行吗?棉蚜单头真心太小了  怕是一下子就没有了吧
4楼2013-11-20 08:36:23
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jasco

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
多收集些混在一起,trizol提取就可以了
5楼2013-11-20 10:17:37
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Eva2009

禁虫 (初入文坛)


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-11-21 08:53:12
本帖内容被屏蔽

6楼2013-11-20 15:45:46
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 摩羯的心 at 2013-11-20 08:36:23
用研磨器行吗?棉蚜单头真心太小了  怕是一下子就没有了吧...

小的研磨器是可以的。或者你用液氮,就像6楼说的,用液氮。研磨棒不好弄,你可以把蓝枪头烧一下,在放到离心管里做成研磨棒。
戒骄戒躁,坦荡做人,平常心做事,享受生活之美!!
7楼2013-11-20 23:20:11
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摩羯的心

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 疯狂修行者 at 2013-11-20 23:20:11
小的研磨器是可以的。或者你用液氮,就像6楼说的,用液氮。研磨棒不好弄,你可以把蓝枪头烧一下,在放到离心管里做成研磨棒。...

非常感谢
8楼2013-11-21 10:45:14
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JuanziXu

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

单头可以提取到的,我们试验过!不过技术要很娴熟,操作很小心才行!不用液氮也可以的!
9楼2013-11-22 16:24:37
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