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幸福小草

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE上样量和条带深浅

请教下SDS-PAGE上样量一样为何条带会有深浅(提取蛋白的溶液组分不一样,尿素提取得到的蛋白质电泳上浅,sds提取的颜色深)
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同东中郎将

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 幸福小草 at 2013-11-14 18:53:23
不是膜蛋白,可是上样量是一样的啊。...

1,测的是总蛋白的浓度。
2,SDS溶解你的蛋白更彻底,尿素没有完全溶解你的目的蛋白。
3,一般测蛋白方法都有局限性和偏差。
4,那你是做包涵体了,不然用不到尿素的吧。
曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
6楼2013-11-14 20:03:04
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同东中郎将

新虫 (小有名气)

这个很正常啊,你的是膜蛋白吧???
曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
2楼2013-11-12 22:52:37
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cloudrosy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
尿素和 SDS 对同一种定量方法的干扰程度也可能是原因, 导致实际浓度和上样量不一样。尿素提取蛋白不能用BCA法测浓度。
3楼2013-11-14 15:54:20
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幸福小草

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cloudrosy at 2013-11-14 15:54:20
尿素和 SDS 对同一种定量方法的干扰程度也可能是原因, 导致实际浓度和上样量不一样。尿素提取蛋白不能用BCA法测浓度。

用的考马斯亮蓝测的浓度,如果上样量一样的话,那对应的条带的深浅应该是一样的吧?
4楼2013-11-14 18:49:01
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