24小时热门版块排行榜    

查看: 4197  |  回复: 8

幸福小草

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE上样量和条带深浅

请教下SDS-PAGE上样量一样为何条带会有深浅(提取蛋白的溶液组分不一样,尿素提取得到的蛋白质电泳上浅,sds提取的颜色深)
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

同东中郎将

新虫 (小有名气)

这个很正常啊,你的是膜蛋白吧???
曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
2楼2013-11-12 22:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cloudrosy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
尿素和 SDS 对同一种定量方法的干扰程度也可能是原因, 导致实际浓度和上样量不一样。尿素提取蛋白不能用BCA法测浓度。
3楼2013-11-14 15:54:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

幸福小草

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cloudrosy at 2013-11-14 15:54:20
尿素和 SDS 对同一种定量方法的干扰程度也可能是原因, 导致实际浓度和上样量不一样。尿素提取蛋白不能用BCA法测浓度。

用的考马斯亮蓝测的浓度,如果上样量一样的话,那对应的条带的深浅应该是一样的吧?
4楼2013-11-14 18:49:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

幸福小草

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 同东中郎将 at 2013-11-12 22:52:37
这个很正常啊,你的是膜蛋白吧???

不是膜蛋白,可是上样量是一样的啊。
5楼2013-11-14 18:53:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

同东中郎将

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 幸福小草 at 2013-11-14 18:53:23
不是膜蛋白,可是上样量是一样的啊。...

1,测的是总蛋白的浓度。
2,SDS溶解你的蛋白更彻底,尿素没有完全溶解你的目的蛋白。
3,一般测蛋白方法都有局限性和偏差。
4,那你是做包涵体了,不然用不到尿素的吧。
曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
6楼2013-11-14 20:03:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forensic110

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以用Qubit仪器专业的测蛋白的试剂,测一下蛋白含量,调整上样,跑出来的就会好很多。或者用BCA的的定量试剂盒,但误差较大
7楼2013-11-19 13:30:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

louisa俊

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们用的是改良的LORROY法测蛋白浓度
8楼2013-11-19 15:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

幸福小草

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by louisa俊 at 2013-11-19 15:00:45
我们用的是改良的LORROY法测蛋白浓度

你们用过考马斯亮蓝测浓度吗?会存在标准曲线不准确的情况吗?
9楼2013-12-03 08:36:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 幸福小草 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 11:52 by l0VvVHGBGRLv
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 7/350 2026-08-30 11:51 by l0VvVHGBGRLv
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:40 by l0VvVHGBGRLv
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 11:18 by l0VvVHGBGRLv
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 11:07 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +3 雨打竹帘 2026-08-30 3/150 2026-08-30 09:43 by KNIGHT2011
[基金申请] 29号明天会评吗 +3 笨笨唐 2026-08-28 3/150 2026-08-30 09:29 by cww8181
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:28 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:28 by ZPa0EcMwuECS
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-30 02:40 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +5 德尚中行 2026-08-27 6/300 2026-08-29 18:10 by manplx
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见