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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 酵母有氧发酵问题求助
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kaka1045

铜虫 (小有名气)

[求助] 酵母有氧发酵问题求助已有2人参与

现在我们做酵母有氧发酵，表达胞内产物，采用流加方式补料，现在有几个问题，希望可以得到大家的帮助。
1.在校正溶氧的时候，是让我发酵之前，按照发酵时的空气流量和转速的溶氧为100%还是让最大转速最大空气流量时的溶氧为100%？
2.现在发现不断的补料溶氧会保持在较低的水平，10以下，如果我少补点料，可能会在20左右，这样是不是酵母就没有10以下的时候长得多？
3.恒速流加时候，溶氧一开始下降，然后10多个小时候就升上来了，在过10小时又下降了，这是怎么回事？是因为补料不够，菌就不长了，老菌就死亡了，一会糖多了，新的菌也长大了，又开始消耗氧气了？
4.我们是在后期积累胞内产物，如果一直补料，逐渐提高浓度，或者采用指数流加，让酵母溶氧保持在10以下，然后后期突然减少补料，让溶氧升高一些，我的产物是不是会提高？不断补料的话，可能酵母会一直保持在10以下，不断的传代生长，那么我什么时候停止补料呢？是不是他长一周都不停啊
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1楼2013-10-25 11:36:04
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kaka1045

铜虫 (小有名气)
2楼2013-10-25 12:56:24
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boying0928

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励热心应助！ 2014-02-22 20:19:41
1.在校正溶氧的时候，是让我发酵之前，按照发酵时的空气流量和转速的溶氧为100%还是让最大转速最大空气流量时的溶氧为100%？
最大转速最大空气流量时的溶氧为100%!
2.现在发现不断的补料溶氧会保持在较低的水平，10以下，如果我少补点料，可能会在20左右，这样是不是酵母就没有10以下的时候长得多？
是的，但这是个平衡问题。
3.恒速流加时候，溶氧一开始下降，然后10多个小时候就升上来了，在过10小时又下降了，这是怎么回事？
是因为补料耗尽，溶氧回升。

4.我们是在后期积累胞内产物，如果一直补料，逐渐提高浓度，或者采用指数流加，让酵母溶氧保持在10以下，然后后期突然减少补料，让溶氧升高一些，我的产物是不是会提高？不断补料的话，可能酵母会一直保持在10以下，不断的传代生长，那么我什么时候停止补料呢？是不是他长一周都不停啊
这个需要具体实验决定。
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热爱这里。
3楼2013-10-25 21:36:28
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kaka1045

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by boying0928 at 2013-10-25 21:36:28
1.在校正溶氧的时候，是让我发酵之前，按照发酵时的空气流量和转速的溶氧为100%还是让最大转速最大空气流量时的溶氧为100%？
最大转速最大空气流量时的溶氧为100%!
2.现在发现不断的补料溶氧会保持在较低的水平， ...

第三个问题，不是说溶氧太低了会抑制菌的生长吗？怎么10的比20的会长得好？
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4楼2013-10-28 09:23:52
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baoqie121314

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
laozuzunzhe: 金币+3, good！ 2014-02-22 20:19:53
kaka1045: 金币+20, ★★★★★最佳答案 2014-03-07 07:48:05
楼上的答案最好不要采纳，
1.校正溶氧的时候按照发酵时的空气流量和转速的溶氧为100%
2.多补料之所以溶氧会下降是因为你补料中的碳源决定的，因为碳源进入细胞内，菌体进行有氧呼吸，也就是进行三羧酸循环，需要氧气，你的搅拌和通气量不变时，消耗的氧气越多，发酵液内的DO就越低，当碳源少了，利用的碳源就少了，自然氧气需要的就少了，DO就升高了，至于长得好不好，是因为你通入的碳源多了，产生了大量ATP，有足够的能量进行分裂繁殖，菌体生长自然是相对好，但是要保证你所要的产品是否菌生长好，产品也多，来决定。
3.恒速流加时候，溶氧一开始下降，然后10多个小时候就升上来了，在过10小时又下降了，这是怎么回事？是因为补料不够，菌就不长了，老菌就死亡了，一会糖多了，新的菌也长大了，又开始消耗氧气了？
3..恒速流加时候，溶氧一开始下降，然后10多个小时候就升上来了，在过10小时又下降了，这非常正常，前期的时候菌体量少，补料足够，呼吸的氧就多，DO下降，10多个小时，碳源不够都进行消耗碳源，所以利用氧下降，而且当菌体生长到稳定期时，消耗氧的量也在减少，后期溶氧会下降，因为菌体高密度发酵时，菌密度变大，发酵液溶解氧气的量下降，所以溶氧会下降
4.对于你所说的是在后期积累胞内产物，就是次级产物，要想进行次级产物多，那就不能一直让其生长，个人认为，前期让其快速涨到一定生物量，而后控制补料，调整C/N摄入量。不过一切还的你自己通过实验来证明，真么样控制好
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5楼2014-02-20 23:26:30
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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼

【答案】应助回帖

5楼说的还比较不错的，鞭辟入里！从生化的角度进行了表观现象的分析。2楼说的就有点浅尝辄止了；尤其是第一条真的不敢苟同，每个工艺都有一个起始的参数设置，都达到参数要求后，这个时候定义100%比较好。
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严于律己，宽以待人
6楼2014-02-21 11:28:16
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