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一步PCR 定点突变
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| 最近在做一个突变,目的片段1000,连在一个4000多的载体上。想先用突变引物将整个质粒扩出来,然后用DpnI处理模板。但是经过多次PCR 均没有扩出质粒。想请问一下做过一步定点突变的朋友,在设计引物及反应体系方面的经验,谢谢! |
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