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tom8559

新虫 (初入文坛)

[交流] 引物设计8个保护碱基 会不会反而影响酶切

如此神奇的我来到新加坡这边做了2个多月的克隆，竟然都还没做出来。之前选择EcoRI和BamHI的酶切位点，六个保护碱基，连到T载体上，酶切回收连接，最后双酶切验证都是T载体和目的片段，怎么也不是我需要的质粒。现在换了酶切位点，选择了SpeI和XhoI，加了8个保护碱基，也还是做不出来，我师姐引物用同样的一对儿酶切位点，加了2两个保护碱基，同样的试剂，一次就做出来了。朋友们，谁遇到过我这种情况，就建议和帮助！谢谢大家了
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1楼 2013-10-17 11:49:37
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