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tom8559

新虫 (初入文坛)

[交流] 引物设计8个保护碱基 会不会反而影响酶切

如此神奇的我来到新加坡这边做了2个多月的克隆,竟然都还没做出来。之前选择EcoRI和BamHI的酶切位点,六个保护碱基,连到T载体上,酶切回收连接,最后双酶切验证都是T载体和目的片段,怎么也不是我需要的质粒。现在换了酶切位点,选择了SpeI和XhoI,加了8个保护碱基,也还是做不出来,我师姐引物用同样的一对儿酶切位点,加了2两个保护碱基,同样的试剂,一次就做出来了。朋友们,谁遇到过我这种情况,就建议和帮助!谢谢大家了
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