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轩尼骑士

新虫 (初入文坛)

[求助] 跑胶marker跑得不清晰


跑胶marker跑得不清晰
20131008_213356.jpg
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1楼 2013-10-10 08:27:54
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轩尼骑士

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ccchudi at 2013-10-10 09:24:33
好暗，电流多大啊？稳定不啊，感觉也是胶的问题呢

电流60mA，那你能告诉我你跑电泳是多大电压和电流啊，胶是1%的琼脂糖加的10000*sybr Green1核酸染料0.8ul，不知道有没有问题 求指教
谢谢
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4楼2013-10-10 17:06:13
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轩尼骑士

新虫 (初入文坛)
又跑了一次 还是这样
跑胶marker跑得不清晰-1
20131009_204920.jpg
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5楼2013-10-10 17:11:33
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轩尼骑士

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ccchudi at 2013-10-10 19:01:20
我一直都用EB染色，110V恒压大约30~45min看情况了，胶浓度多用0.8%。你的缓冲液是TBE还是TAE？电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，可能产生条带模糊和不规则的DNA带迁移。再有，就是排除一下污染的可能性。换几管 ...

用的是TAE缓冲液，这个电泳液只是第二次用，应该不是这个的原因吧
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7楼2013-10-11 08:26:06
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轩尼骑士

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 猫di阁楼 at 2013-10-11 11:38:45
好像看不到条带啊，我们一般是：一微升的marker混合一微升的loading buffer，共两微上样。
胶浓度是1%，电压：110V，跑大约35分钟，条带很清楚的。

我们买的marker说明书上说自带loading buffer，不需要加，直接5微上的样
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9楼2013-10-11 13:32:38
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轩尼骑士

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 867575969 at 2013-10-11 15:02:21
缓冲液少了没浸没胶！

这个保证没有  ，肯定没过了
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11楼2013-10-11 15:14:07
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