应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » UVP质粒凝胶定量分析
61/1返回列表
查看: 1182  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Sofia1004

新虫 (小有名气)

[求助] UVP质粒凝胶定量分析

我们实验室的凝胶成像分析系统用的UVP的，每次跑完电泳，师兄师姐都用肉眼对比一下亮度，通过Marker判断质粒有多少ng。我觉得肉眼判断不准，想通过UVP自带的软件分析得到结果，于是自己研究了下。
我的marker是TaKaRa公司的Supercoiled DNA Ladder Marker。通过肉眼判断，我的质粒条带的亮度与marker中最亮的5kbp的条带相同，即150ng。用软件得到的浓度却是50ng。不知道为什么是这个结果。
可能是我用软件用的不对？我们通常不都是看有多少ng吗？软件的定量里用的是浓度，那应该怎么输入和计算啊？直接按ng输，得到的结果也认为是多少ng不行吗？
还有就是北京校正，好像是有好几种方式，比如Rolling Disc,让输入数值，我输了6，这时峰比较尖锐，我也不懂，以为这种情况比较好，应该怎么样设数值啊？是不是这个问题也影响了实验结果啊？
希望高人不吝赐教，不胜感激！或者相关的中文教程的资源，能够提供一下？谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-11-30 09:49:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sofia1004

新虫 (小有名气)
这是我的凝胶图：中间是我的质粒条带，右一是Supercoiled DNA ladder marker
赞一下 回复此楼
2楼2011-11-30 09:59:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

space3063

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励新虫发帖交流。 2011-11-30 18:29:24
Sofia1004(金币+2): 谢谢！ 2011-12-01 08:32:12
Sofia1004(金币+3): 谢谢！ 2011-12-10 09:25:36
内容已删除
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-11-30 12:52:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sofia1004

新虫 (小有名气)
内容已删除
回复此楼
4楼2011-11-30 15:06:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

高天上圣

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

Sofia1004(金币+2): 谢谢！ 2011-12-01 08:31:49
Sofia1004(金币+3): 谢谢 2011-12-10 09:27:27
无论是跑胶还是紫外都有误差，紫外的OD值在0.2-0.8之间才可信，最好在0.5左右。跑胶因为光的弥散作用有时误差很大，建议在紫外灯下肉眼观察一下。
赞一下 回复此楼
问鼎九州，逐鹿中原！
5楼2011-11-30 21:11:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sofia1004

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 高天上圣 at 2011-11-30 21:11:31:
无论是跑胶还是紫外都有误差，紫外的OD值在0.2-0.8之间才可信，最好在0.5左右。跑胶因为光的弥散作用有时误差很大，建议在紫外灯下肉眼观察一下。

说的有道理！不过我这有本实验教科书，说OD在0.1-0.5之间才可信。谢谢！
赞一下 回复此楼
6楼2011-12-01 08:31:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Sofia1004 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭